柿叶单宁提取及其含量的测定.doc

柿叶单宁的提取及其含量的测定 山东潍坊学院 生物与农业工程学院 10级设施农业专业 柏显首 山东潍坊学院 生物与农业工程学院 10级生物技术专业 谷 鹏 山东潍坊学院 生物与农业工程学院 09级生物技术专业 张培亮 摘要 用乙醇酸溶液从中提取。用对提取液中含量进行测定。 及其测量花青素含量的原理 2.2 熟练掌握分离提纯操作方法步骤。 中含有，用乙醇的酸溶液作为提取液。 实验仪器及试剂 仪器：电子天平；钥匙；；烧杯；；ml容量瓶（支）；恒温水浴锅 试剂：粉末状(自备)； 分析纯的乙醇试剂 500 ml 分析纯的盐酸50ml 实验步骤 mol/L） 配制方法 乙醇酸溶液 -- 按85：15的比例将分析纯的乙醇溶液与去离子水混合，再用浓盐酸调节PH至1.0左右。0.08 mol/L 准确称取醋酸锌1.756g，用水溶解后加几滴冰醋酸定容至100 ml 乙二胺四乙酸二钠标准溶液 0.0500 mol/L 准确称取乙二胺乙酸二钠9.306g，溶解于水中，并用水稀释至500 ml.必要时进行标定 NH3-NH4CL pH=10 称取54gNH4CL,加水溶解后加入氨水350 ml，用水定容至1000 ml 铬黑T指示剂 -- 称取0.59g铬黑T，溶于10 mlpH=10的NH3-NH4CL缓冲溶液中，用乙醇（φ=95%）定容至100 ml. 5.2 柿叶单宁的提取 1. 准确称取三份约的干粉将开口端折叠封住，放入提取筒中 2. 将200ML的圆底烧瓶安装于电热套上放入几粒沸石。 3. 将120ML的乙醇酸溶液从提取筒中加入到圆底烧瓶中，安装好索氏装置 4. 打开电源加热回流约2小时得到单宁粗提取液。 5.3 络合滴定法测柿叶总单宁含量 5.3.1标准曲线的绘制 取7个50ml容量瓶, 均加入5ml 0.08mol/L醋酸锌及1.4ml浓氨水, 摇动至沉淀完全溶解, 分别加入单宁酸标准液0～20ml, 摇匀, 室温下放置片刻, 加蒸馏水至50ml, 混匀, 过滤, 取滤液5 ml, 加20ml左右蒸馏水, 2.5ml pH10 NH4OH─NH4Cl缓冲液, 3滴0.1%铬黑T溶液(95%乙醇), 以0.005mol/L EDTA溶液滴定, 终点由酒红色变为天蓝色, 记下EDTA滴定体积数。用EDTA滴定的ml数作纵坐标, 单宁mg量作横坐标, 绘制单宁酸标准滴定曲线。 5.3.2样品的测定 取滤液10～20 ml, 按制备单宁标准曲线的方法进行测定, 另取同量滤液作空白滴定.。 6 实验记录及数据处 1 绘制标准曲线数据 单宁含量（mg） 0 2 4 6 8 10 体积/ ml 表2 记录数据： 样品1 样品2 样品3 体积（ml） 7 结果计算 8注意事项 8.1 注意实验过程中的安全问题 8.2 要有节约药品的意识 8.3 注意操作的规范性 9 费用计算 60元 参 考 文 献 2