黄桃水溶性多糖的抗肿瘤作用和清除自由基、提高免疫活性研究.pdfVIP

格低廉的优势，也越来越受到重视。本文以黄桃为原 配制方法：精确称取黄桃多糖样品以牛理盐水稀释， 料，提取并分离纯化出两种水溶件的多糖HTPl和配制成所需的各档试液。每鼠每天注射体积为0．5ml。 HTP2，充分研究了它们的生物括性。 给药方案：腹腔给药，每天1次，连续1Od。 试验对照：阴性对照给以与试验组等体积的生理盐 材料与方法 水，给药方案为腹腔给药，每天1次，连续l0d。抗 1．1 材料 过氧化氢、七水硫酸可E铁、水杨酸、乙醇、邻 天1次，连续7d。免疫阳性对照样品云芝多糖29，kg， 苯三酚、盐酸等均为国产分析纯。注射用环磷酰胺， 灌胃给药，每天1次，连续lOd。 上海华联制药厂出品。云芝多糖胶囊，上海中西药业 1．42 对Lewis肺癌足趾接种的疗效试验 股分有限公司出品。 取生长旺盛的瘤源，无菌条件下匀浆法制备成约1 实验用C5B啪小鼠由}海医药工业研究院动物组供 ×107，ml细胞悬液，相应宿主每鼠足趾皮下接种0．05ml， 给，合格证号：沪合动证字第l17号。体重19～229， 只，次日按实验设计方案给药，二周后处死各组动物截 性别为雌性。 取足趾称重，按以下公式计算肿瘤抑制率。肿瘸抑制率 1．2 清除羟基自由基(·oH)的测定psl ％=f(对照组平均荷瘤足趾重一给药组平均荷瘤足趾重y(对 按照smirnoff(1989)的方法(有改动)。利用H：0：与 100％ 照组平均荷瘤足趾重一空白组平均足趾蘑)】x Fe 2+混合产生·OH，在体系内加入水杨酸捕捉·OH 1143对荷Lewis肺癌小鼠的NK细胞活性的测试 并产生有色物质，该物质在510nm下有最大吸收。反 同1．4．2法接种肿瘤，末次给药后次日解剖各组小 H幻21ml、9mmol，LFesO·lml、 应体系中含8．8衄ol，L 鼠，无菌摘取脾脏，制备成单个脾细胞悬液，低渗除 9mmol，L水杨酸一乙醇lml、不同浓度的多糖溶液lml。 去红细胞，将细胞悬液转入培养瓶中37℃培养lh后去除 最后加HzOz启动反应，37℃反应0．5h，以蒸馏水为参 贴壁细胞，计数活细胞调整至3×100个细胞『ml，作为 比，存510nm下测量各浓度的吸光度。考虑到多糖本 效应细胞。靶细胞取L929体外培养细胞常规培养24h， Fes04 身的吸光值、以9mm01，L lml、9mm01，L水杨酸一 以培养液调整细胞浓度为1．5×105个细胞，ml，使效靶细 乙酸1Inl、不同浓度的多糖溶液lⅡLl和lI【Il蒸馏水做为多 胞比为20：l。取96孔培养板分别加入效应细胞和靶细胞， 糖的本底吸收值。清除率计算公式： 另设效应细胞和靶细胞对照，于37℃，5％cO。条件培 清除率(％)．(Ao-(Ax—Ax0))，A0×100％ 养4h后，加入MTT染色液，再培养2h后加入消化液