生物物理课5-6.ppt

5.脂质及脂质聚集 脂双分子层的动态性质 脂类分子在Lipid Bilayer 中可能有的运动方式 脂肪酰链内的旋转异构化运动(内旋转) 碳氢链中各亚甲基 (-CH2-) 处于 trans 与 gauche 构象之间的转换之中 trans ? gauche correlation time: 10-10 Sec 这种快速的构象动态转变是脂双层流动性的分子基础 流动性高 ? gauche 构象占的比例高 (平均每个脂肪酰链可有2个gauche构象) 流动性低 ? gauche 构象占的比例减少。 整个磷脂分子绕其长轴的旋转 整个分子绕长轴旋转的平均速度比链内旋转异构化运动的速度要慢得多：correlation time: 10-6 ? 10-8 Sec 测量方法；polarization spectroscopy 荧光偏振 红外偏振 膜组分在脂双层内的侧向运动 整个分子绕长轴旋转的平均速度比链内旋转异构化运动的速度要慢得多：correlation time: 10-6 ? 10-8 Sec 测量方法；polarization spectroscopy 荧光偏振 红外偏振 膜组分在脂双层内的侧向运动 Fick第一扩散定律 单位时间通过横截面的溶质分子数(dn/dt)与横截面的面积A及浓度梯度dC/dX成正比, 扩散速度＝dn/dt ? A?dC/dX ＝－DA ?dC/dX D为扩散系数，cm2/s，负号表示扩散过程 由高浓度到低浓度。 膜组分在脂双层内的侧向运动 扩散系数D : 磷脂 D : 10-8 cm2/Sec (in lipid bilayer) 膜内在蛋白 D : 10-10~10-12 cm2/Sec (in lipid bilayer) 水溶性蛋白 D : 10-7 cm2/Sec (in water) 测量方法： Photobleaching 原位电泳 脂类分子在脂双层之间的翻转运动 (flip-flop) 很慢！ 几小时 ? 几天 测量方法： electron spin resonance (ESR) 脂质的相性质 Cholesterol/Lipid interactions 胆固醇与膜脂作用的选择性 脂质聚集体的形成 脂质分子几何与聚集体的多型性 The molecular shape of lipids determines the physical properties of membranes 非脂双层结构 非脂双层结构 脂质交错对插排列 HII六角型结构 立方相结构 6.膜的带电性质 膜- 水界面的静电势 膜- 水界面的静电势 细胞膜大约含有10－20％带有负电荷的脂分子。脂双层中一个磷脂分子的面积大约60?2，因此对于有20％负电磷脂的膜，其双分子层的平均电荷密度约为1个电荷/300?2 。 这些电荷使膜在水相中产生负的静电势，而体相的电势定义为零。 膜- 水界面的静电势 当体相中单价离子的浓度为10－1M温度为250C时，根据Gouy-Chapman理论的推测表面电势为－60mV。与室温下溶液中单价离子的 kT/e 值为25mV相比较，此表面电势应当是一个很大的值，它将影响到许多与膜有关的现象。 脂双层表面单价阳离子的浓度要比该离子在体相中的浓度高一个数量级。因此，表面pH值要比体相低一个单位，这个现象将影响到许多与酶有关的过程。 比如，由于膜对离子的渗透率是与表面处离子的浓度有关，所以膜的渗透率将受到表面电势的影响。 盐析现象 随着盐浓度的增加，带电表面的Debye length 减小，相当于 ciunter-ions 更有效地屏蔽，以至于溶液中相同的生物大分子能够接近。 当大分子足够接近时，van der Waals 引力起作用而使其聚集结絮，最终沉淀出来。 几种不同的蛋白各自在一定的盐浓度下沉淀，从而达到分离的目的。 注意！Counter-ions 只屏蔽生物大分子电荷，而不能屏蔽van der Waals 的瞬时偶极子(其频率为1015Hz！) 二价离子的膜表面富集 脂质体免疫分析法(LIAS): 利用PE脂的多型性转变，释放内含物从而达到检测抗原(抗体)，药物的目的。 Target-sensitive immunoliposome, TSIL, 靶向释放药物机理的图示 立方相结构 ------脂双层形成的具有立方体对称性的各向同性的液晶态结构。 立方相的性质 一、立方相的微观行为： 尽管立方相结构中分子的烃链处于液体状态，但其具有三维的长程有序性。这种三维周期性结构可以由X射线（或中子散射实验）证实。这也是区分立方相与凝胶相的方便的方法。