色谱柱的维护及保养No.1.0.ppt

色谱柱的维护及保养 大连依利特分析仪有限公司 色谱填料的种类及参数 色谱柱评价的注意事项 色谱柱在使用过程中容易出现的问 题及解决办法 色谱柱的保存 色谱柱是液相色谱仪的 心脏 现代高效液相色谱中,不要总是首先埋怨仪器!!! 分离效果好坏很大程度 上取决于色谱填料的选 择.但是色谱填料的选择 范围很宽,要做合适的选 择,必须对此有一定的认 识和了解 一.色谱填料的种类及性能参数 1. 种类 填料基质 2. 填料粒度 商品化的填料从 1μm ~30μm 目前常用于分析 3μm ,5μm ,10μm 用于半制备 10μm ,15μm 用于制备 15μm ~40μm 3 μm 填料 3. 性能参数 Hypersil SinoChrom Hypersil BDS Betasil Spherisorb Kromasil LiChrosorb 不同品牌填料性能参数比较 注意事项: 1.参数 品牌 批号不同分离效果有差异 2. 相同粒度球形 无定形压力不同 3. 国产 进口填料寿命不同 如: 氟苯法分析氨基酸 酯溶性维生素D 小结: 1.换不同品牌色谱柱需要重新摸条件 2. 能用短柱 不用长柱 3. 能用进口柱 不用国产柱 二.色谱柱评价注意事项 1.尽量减少死体积 2.色谱柱的评价流动相条件 流速设定 柱效 N=5.54(tr/tg)2 三.色谱柱使用过程中易出现的问题及解决办法 1.谱图分叉 首先判断柱头是否 柱头塌陷? (按色谱柱评价报告 的条件评价色谱柱) 修补前后现象 样品分解 色谱柱的修复 柱头塌陷修复办法 拧下柱头螺帽(最好在台虎钳上) 用尖针轻轻除掉柱头表面的污染填料 取少量与色谱柱相同的新填料,调成浆糊状(正相用正己烷,反相用甲醇) 填实柱头(轻轻下压) 更换柱头过滤板,将柱头螺帽拧紧 (柱头填料下陷3mm修复后效果也不会理想 2.泵压力升高 不要认为压力高就是色谱柱的问题 首先判断是否是色谱系统管路阻塞? 方法: (分段检查在线过滤器→进样阀→色谱柱→ 检测器→排液管) 现象原因及解决办法 四.色谱柱的保存 短期不用必须冲洗干净后保存. 长期不用每隔2~3个月冲洗一次 防止强烈振动 正相系统换反相系统注意事项 1.???? 首先用正己烷(硅胶柱)将色谱系统包括正相柱平衡好(保证20分钟内基线平直,无峰出现) 2.???? 卸掉硅胶柱,封好保存, 3.???? 将进样阀与检测器短路,用异丙醇冲洗色谱系统 10分钟(流速1ml/min).在这期间空拨进样阀三次. 4.???? 换甲醇(或已睛)冲洗系统20分钟(流速2ml/min) . 此期间空拨进样阀三次. 5.???? 安上反相色谱柱, 流速调到1ml/min,用甲醇(或已睛)冲洗系统, ,直到系统平衡. 6.?????? 进三针标准品,检验面积 ﹑保留时间是否重复,若不重复,继续冲洗直到重复. 反相系统换正相系统注意事项 1.首先用甲醇(或已睛)将色谱系统包括反相柱平衡 好(保证20分钟内基线平直,无峰出现) 2.卸掉反相柱,封好保存, 3.将进样阀与检测器短路,用异丙醇冲洗色谱系统 10分钟(流速1ml/min). 在这期间空拨进样阀三次. 4.换正己烷(硅胶柱)冲洗系统20分钟(流速2ml/min) . 此间 空拨进样阀三次. 5.安上硅胶色谱柱, 流速调到1ml/min,用正己烷冲洗系统, 直到系统平衡. 6.进三针标准品检验面积 ﹑保留时间是否重复,若不重复, 继续冲洗直到重复. 谢谢大家 联系电话:0411 传真: * 色谱柱填充 光分解,氧化分解,溶剂分解 严格过滤流动相和样品, 检查