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肺炎衣原体(AR39)基因的生物信息学分析
摘要:肺炎衣原体的核酸杂交检测衣原体的特异性强,但敏感性不高,主要用于PCR结果的检测、判定,尚未直接用于临床标本的检测;PCR具有较高的敏感性,应用肺炎衣原体 MOMP基因片段的2对特异性引物对临床咽拭子进行PCR测定,其结果与血清学检测具有较好的一致性。肺炎衣原体引起人的非典型性肺炎,同时还可致支气管炎、咽炎、鼻窦炎、中耳炎、心内膜炎、脑膜炎、结节性红斑等疾病,也是艾滋病、白血病等继发感染的重要病原菌之一, 流行病学和病原学研究认为,肺炎衣原体感染与心血管疾病相关,已引起各国学者的高度重视肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae Cpn)是1989年定名的新种,首株肺炎衣原体是于1965年从台湾省一名儿童的眼部用鸡胚分离出的,暂名为TW-183T(小T示原型株),1983年又从西雅图一名患咽炎的大学生咽部分离出一株AR-39,因其一些生物学性状类似于鹦鹉热衣原体,所以当时归于鹦鹉热衣原体种中TWAR组,后经深入研究,根据其独特的超微结构及基因和特异性抗原分析,于1989年定为衣原体属中一个新种,正式定名为肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae)。肺炎衣原体只有一个血清型,98kD蛋白为其特异性抗原,代表株为TWAR。目前已新分离出10多株肺炎衣原体,该衣原体是一种重要的呼吸道病原体。
肺炎衣原体主要引起人的非典型性肺炎,同时还可致支气管炎、咽炎、鼻窦炎、中耳炎、虹膜炎、肝炎、心肌炎、心内膜炎、脑膜炎、结节性红斑等疾病,也是艾滋病、白血病等继发感染的重要病原菌之一,另外,流行病学和病原学研究认为,肺炎衣原体感染与心血管疾病相关,已引起各国学者的高度重视。
编辑本段病原
肺炎衣原体的原体形态多样,电镜下可呈现典型的梨形,其长轴长0.44μm,短轴长0.31μm,平均直径为0.38μm。核区呈圆形,位于细胞中央,平均直径为0.24μm,核区和细胞膜之间有较宽的原生质区。肺炎衣原体不能体外培养,只能在细胞内寄生,鸡胚对其不敏感,因此一般不用鸡胚传代,而用细胞培养传代,肺炎衣原体敏感的细胞株为HEP-2或H-292,离心能促进肺炎衣原体对细胞的感染。肺炎衣原体包涵体不含糖原,碘染色阴性,在Hela细胞中的形态与鹦鹉热衣原体十分相似,姬姆萨染色后呈深密度卵圆形,在HEP-2细胞中的包涵体,其密度和形态均多样化,有致密的、桂花样散在的、有伸出胞外出瘤状的、还有圆形、胞内着色较少的包涵体。
肺炎衣原体具有属特异性抗原和种特异性抗原,属特异性抗原主要有两个抗原决定簇表位,一个是肺炎衣原体 LPS核心多糖的第三个KDO残基,一个是分子量为39.5KD的主要外膜蛋白(MOMP),这两个抗原决定簇均对甲醇敏感,与其它衣原体种间存在交叉;肺炎衣原体的种特异性抗原为98KD的MOMP,该抗原对丙酮敏感,并不与沙眼衣原体和鹦鹉热衣原体抗血清发生交叉反应,已由种特异性单克隆抗体得到证实。到目前为止发现肺炎衣原体仅存在一种血清型,世界不同地区分离的肺炎衣原体不同株DNA的同源性可达94%以上,其限制性内切酶图谱基本一致,标准株为TW-183和AR-39。
肺炎衣原体毒力较低,3代之内不能致死鸡胚,小鼠鼻内、脑内和静脉内接种,不引起小鼠死亡,猴结膜内接种,不发生滤泡性结膜炎。对药物的抗菌谱类似其他衣原体,耐磺胺类药物。
编辑本段控制措施
肺炎衣原体呼吸道感染是世界各地广泛存在的常见病,引起地方性和流行性肺炎,无显著的性别和地区差异,一年四季均可发生,几乎每人一生中均受过感染,而且常常反复感染;感染是双峰分布,第一个高峰在8-9岁,第二个高峰在70岁。潜伏期约10-65天。
一般认为肺炎衣原体感染与鸟类及其它动物无关,人是肺炎衣原体的然宿主。肺炎衣原体在硬天塑料表面能存活30小时,在草纸上能存活12小时,在手上存活时间仅10-15分钟。因此,肺炎衣原体的传播方式可能主要是人-人通过飞沫传播,也可从环境中接触后通过手自体接种,其预防措施应与其他呼吸道传染性疾病相同,如流行期不要在人群密集的地方停留时间过长,经常洗手等等。肺炎衣原体目前还没有疫苗用于免疫接种。
肺炎衣原体
AE002161 1229853 bp DNA circular BCT 05-MAR-2010
(2)选取与 AE002161 相对的同源系列如下:
(2) 在clustal中比对后的结果如下:
(3)从比对的开始可以看出他们之间的碱基是有很大区别的,,开始只有第五条有。
分析:中间的可以看出,除了第五条外,其余的还是能对齐的,说明他们之间的同源性相对第五条高些。
比对后减去不齐的部分,把剩余的部分放在MEGA4软件中构建系统树。构建好的系统树如下图所示:
本次所用到的相关数据如
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