血管紧张素Ⅱ介导的大鼠血管平滑肌细胞STAT1激活与核转位.pdfVIP

维普资讯 · 16 · 心 脏 杂 志 (ChinHeartJ)2007，19(1) 血管紧张素 II介导的大鼠血管平滑肌细胞 STAT1激活与核转位 张海燕，廖玉华，魏宇淼，孙艳香，朱 峰，王 敏，郭和平 (华中科技大学同济医学院心血管病研究所，附属协和医院心内科，湖北 武汉430022) 摘要：目的 检测血管紧张素 II(AngII)介导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖过程中信号转导和转录活化因 子．1(STAT1)的激活与核转位。方法 本文采用 Western印迹 、非同位素凝胶电泳 (EMSA)和免疫荧光染色的方 法，观察AngII刺激大鼠主动脉VSMC前后，细胞中STAT1的活化状态与定位。结果 VSMC经AngII干预后，胞 内磷酸化的STAT1(P．STAT1)蛋 白表达增加(P0．01)，达峰后随时间梯度逐渐下降，AngII干预 15min后检测到 胞核内有蛋白．DNA复合物形成。这一反应可被血管紧张素 IIl型受体 (AT．)阻滞剂 Losartan以及Jak2抑制剂 AG490抑制 (P0．01)。免疫荧光染色结果也显示 AngII干预后P．STAT1主要在胞核内表达。结论 AngII可以 通过和AT。受体结合，激活Jak／sTAT通路，在 AngII介导的大鼠VSMC增殖过程中发挥作用。 关键词：血管平滑肌细胞；血管紧张素 II；信号转导；信号转导和转录活化因子 中图分类号：Q344 文献标识码：A 文章编号：1009-7236(2007)01-016-04 Activationand nucleitranslocation ofSTAT1induced by AngH in rat VSM Cs ZHANGHai—yan，LIAO Yu—hua，WEIYu·miao，SUN Yan·xiang，ZHU Feng，WANGMin，GUOHe-ping (InstituteofCardiology，UnionHospital，TongjiMedicalCollege，HuazhongUniversityofScienceand Technoloyg，Wuhna 430022，Hubei，China) Abstract：A Invascularsmoothmusclecells(VSMCs)，theJanuskinase(Jak)／signaltransducer andactivatorsoftrnascription(s11AT)isoneoftheinductionofearlygrowthresponsegenes，and proteinsplayan essential roleinna giotensin II—induced VSMC proliferation ．Toidentifytheactivation andthenucleirtnaslocationofsignaltrnasducersandactivatorsoftranscriptionl(STAT1)inducedby AngIIintherataorticsmooht musclecells．nETHODS Theculturedrataorticsmoothmusclecells werestimulatedwiht AngII．TheproteinexpressionofphosphorylationSTAT1wasdetectedbyWestern blotting．STAT—SIE bindingactivationwasdetectedbyelectrophoreticmobilityshiftassayandthenuclei rtna slocationofphosphorylatedSTAT1wasidentifiedbyimmunofluorescence．RESULTS Western blot— tingshowedthatt