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网上图书批发市场 近来要写个论文,需要下载一些参考文献,但是在中国知网,万方,维普等文献检索网站上只能查看论文摘要,无法下载全文,怎么办呢,于是就开始了百度论文免费全文下载方法的艰苦历程,终于有所收获,找到了一些方法,但是这些方法大部分都已经失效了,无法使用。不过,最终还是让我找到了一个比较好的工具,通过这个工具可以很方便的下载论文全文,解决了网上图书批发市场的问题。 下面就为大家介绍一下这个方法,亲测可用。 其实也很简单 首先,下载一个软件,软件地址: /soft/detail/39244.html 或者:/ 此软件为绿色软件,下载后不用安装,直接解压缩打开 文献检索浏览器。 下图是软件界面: 里面有大量的中英文数据库可供大家使用,下面以知网为例给大家做个演示,其它数据库的使用方法与此类似,首先打开知网数据库 选择一个入口 输入搜索词,搜索 点击标题下载 是不是很简单啊,网上图书批发市场的问题是不是就这样很简单的解决了啊? 这个文献检索浏览器不仅有中国知网免费入口,还有万方,维普,龙源,读秀等数据库的免费入口。 那么问题来了,这个浏览器可以免费使用吗,答案是不能免费使用。 不过注册费用很低,不过就是一瓶饮料钱,不过我认为和大家东奔西走花费很大的精力自己去寻找这些免费入口比起来,简直是太划算了。 好了,下面大家可以测试检索一下下面这篇示例文章,看看是否好用。 乙型肝炎病毒e抗原相互作用蛋白基因的克隆化及功能的初步研究--《中国人民解放军军事医学科学院》2004年博士论文 乙型肝炎病毒(HBV)感染致肝细胞损伤的机制,与病毒蛋白和肝细胞蛋白间的相互作用密切相关。而乙型肝炎e抗原(HBeAg)是由HBV DNA前-C基因区编码的一种非颗粒性的分泌蛋白,随HBV复制而增加,临床上将其作为判断HBV活动性复制的指标之一。因此研究HBeAg与肝细胞内蛋白的相互作用及其机理,能在一定程度上对HBV的致病机制做出解释,并为寻找有效防治方法提供新线索。 酵母双杂交技术是一种研究蛋白-蛋白间相互作用的比较快速、可靠并可大规模筛选的方法。本实验所采用酵母双杂交系统-3,基于两种单倍体酵母a和α型可以配合形成二倍体,而其中表达的外源蛋白仍能相互作用的机理,免去了低效率文库质粒与诱饵质粒共转染的问题,大大提高了杂交效率;在原技术基础上增加了3个报告基因,降低了假阳性率。我们利用该技术,根据中国HBV流行株序列设计引物,应用多聚酶链反应(PCR)技术,由乙型肝炎患者血清中分离出HBeAg编码基因序列。经测序鉴定正确后,克隆入酵母表达载体pGBKT7中构建“诱饵”质粒,转化酵母细胞AH109(a型),表达后通过Western-blotting鉴定产物活性。随后与预转了人肝cDNA文库质粒pACT2的酵母细胞Y187(α型)进行配合,经营养缺陷和蓝白斑双重筛选,获得了HBeAg结合蛋白阳性克隆245株。提取阳性克隆酵母质粒,通过Cacl_2穿孔法转化大肠杆菌,接种于氨苄青霉素-LB平板,筛选阳性克隆并进行序列测定。测序结果在GenBank中进行生物信息学分析,发现未知功能的新基因有6条,已知蛋白基因35条。 博士论文--一摘要 为进一步确证经酵母双杂交技术筛选出的结合蛋白与HBeAg在体外也存在 相互作用,我们根据Genbank中提供的序列信息设计引物,以HePGZ细胞的 mRNA为模板,通过逆转录一PCR扩增出CD81及新基因AK026018的全序列,测 序鉴定后,经相应的限制性内切酶消化后,克隆入酵母表达载体pGADT7,在TNT 网织红细胞裂解物中进行体外翻译,掺入同位素3,s,与HBeAg进行体外免疫共 沉淀反应,经SDS一PAGE电泳,一20℃条件下放射自显影,再次证实上述蛋白间 结合作用的可靠性。 在新基因功能的研究方面,我们对HBeAg结合蛋白新基因AKO26018进行了 初步探讨。首先明确了该基因表达产物的亚细胞定位,主要位于细胞浆中;通过 其对HePGZ细胞基因表达谱芯片的研究,推测该基因可能在细胞中起着多种复杂 作用,可通过多种途径对许多类型基因表达进行调控或影响。通过过表达及SIRNA 抑制实验证实,在LZ .2.15细胞株中HBeAg的分泌量与细胞内AK026018 mRNA 的含量正相关。同时CD81过表达实验证实,随着cD81 mRNA量的增加HBeAg 的分泌量反而降低。因此推测AKo26018基因及cD81对HBeAg的分泌分别有促 进及阻碍作用。 你的网上图书批发市场的问题解决了吗? KKME专业医学搜索引擎/

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