白艾提取液对黄嘌呤氧化酶活性抑制的实验与研究.pdfVIP

第九次全国中西医结合血瘀证及活血化瘀研究学术大会 综上所述，本研究发现梓葛冻干粉针剂可调控人脐静脉内皮细胞抗氧化和凋亡相关蛋白的表达，对 缺氧一复氧损伤有明显的保护作用。其机制可能通过抑制细胞自由基的产生、提高抗氧化能力、调控Bcl一2 本研究首次报道梓醇、葛根素配伍合用对人脐静脉内皮细胞缺氧一复氧模拟的体内缺血再灌注损伤模型的 保护作用，对于更多更确切的保护机制将是课题组进一步探究的内容。 白艾提取液对黄嘌呤氧化酶活性抑制的实验研究 谢建祥1林伟青2王海东2 田 华2 随着人民生活水平的提高及人口老龄化，我国痛风发病率近年来有明显增高趋势。现代医学认为痛 风以嘌呤代谢紊乱，血(尿)中嘌呤代谢最终产物一尿酸持续增高为基本病因。对痛风的治疗多采用秋 水仙碱、非甾体类抗炎药、皮质类固醇、促肾上照皮质激素、黄嘌呤氧化酶及黄嘌呤脱氢酶抑制剂等， 从作用上看在一定程度上起到了控制症状、稳定病情的效果，但终因缺乏清除转化体内病理性产物进行 综合治疗的机制，加之药物的不良反应，难以达到人们企盼的结果。别嘌呤醇是唯一在临床上使用的黄 嘌呤氧化酶及黄嘌呤脱氢酶抑制剂，但是，在临床上发现别嘌呤醇具有较为严重的不良反应如肝炎、超 敏变态反应等，在一定程度上限制了其安全使用，因此发挥中医药的优势，寻求疗效可靠的方法，是摆 在我们面前的一个课题。白艾又名鼠曲草，为菊科植物鼠曲草的全草，性昧甘、平，具有祛风化痰泻浊 功效，用于筋骨疼痛、痈疡等。前期研究证明白艾提取液具有降低血尿酸的作用n1，本实验尝试通过体 外酶学实验探讨其作用机理及为进一步提取其活性成分打下基础。 1实验材料 1．1仪器 箱。 affineD·Don的全草。来自于江西省人民医 1．2植物和试剂白艾为菊科植物鼠曲草Gnaphalium 院药剂科中药房。白艾提取液水提取物的制备按水煎煮工艺由江西省人民医院制剂室自制，浓度为 0．2mg／ml。 析纯试剂。 382 第九次全国中西医结合血瘀证及活血化瘀研究学术大会 2实验方法 2．1溶液配制 2．1．1磷酸盐缓冲液配制 0．2 14．209，KH2P042．729，加蒸馏水，配成500ml 取Na2HP04 mol／L磷酸盐缓冲溶液，pH值调至7．5， 备用。 2．1I2别嘌吟醇(A)液配制 2．1．3黄嘌吟(X)液配制 精密称取氢氧化钠0．069，磷酸二氢钾0．279，PBS液稀释至lOOml，得0．4retool／LX液，备用。 2．1．4黄嘌吟氧化酶(X0)液配制 精密量取黄嘌吟氧化酶40儿(1U)，用PBS液(pH=7．5)稀释至2ml，得0．5U／mlXO液，备用。 2．1．5待测样品配制 配制成0．2mg／ml溶液，备用。 2．2黄嘌呤氧化酶抑制实验 2．2．1A值测定 取40019,0．2mol／L磷酸盐缓冲溶液，15、25、50、100、200PL 个样品平行操作3次．取斜率平均值。测定光密度值每分钟变化值(A)) 2．2．2B值测定 0．4mmol／L黄嘌吟(X)液的各试管中 在含400PL0．2mol／L磷酸盐缓冲溶液，15、25、50、100、200PL 对照)各25、50、100、200PL；之后，在每一试管中加入X0200PL，各试管的总体积为lml。 2．2．3X0活性的计算 率。 2．2．4半数抑制浓度ICso的计算 以抑制率为因变量，以样品浓度为自变量，采用SPSSl5．0统计软件包计算回归方程。根据回归方程 计算抑制率为50％的样品浓度IC的。 3实验结果 383 第九次全国中西医结合血瘀证及活血化瘀研究学术大会 白艾提取液与2恬／m1别嘌呤醇对黄嘌呤氧化酶的抑制作用相当(差异无显著性，P