大鼠离体子宫法与高效液相色谱法测定缩宫素效价的相关性分析.pdfVIP

华东地区第十三届实验动物科学学术交流会 ．81． 大鼠离体子宫法与高效液相色谱法 测定缩宫素效价的相关性分析 许雷鸣1，顾倩2，堵伟锋1，雷德强3，武谷1，廖翔4 (1．安徽省食品药品检验所，安徽舍肥230051； 2．皖南医学院，安徽芜湖241000； 3．华中科技大学附属协和医院，湖北武汉430022； 4．广东医学院附属南山医院，广东深圳518052) [摘要]目的探讨大鼠离体子宫法与高效液相色谱法测定缩宫素效价的相关性。方法采用中国药典 2010年版二部附录缩宫素生物测定法和欧洲药典HPLC法，分别对合成缩宫素标准品溶液和国内不同生产 厂家多批样品的缩宫素效价进行测定。结果两法测定合成缩宫素标准品溶液的缩宫素效价结果吻合；国内 论无干扰情况下两法结果吻合；HPLC法测定结果在国内部分厂家的样品明显超出生物检定本身允许的误 差范围可能主要缘于样品中辅料和杂质的干扰或多肽生物活，}生的差异。本研究为缩宫素效价测定质量标 准的提高提供了参考。 [关键词]缩宫素；离体子宫；高效液相色谱法；相关性 缩宫素是一个含有二硫键的九肽，目前国内缩宫素注射液是以合成缩宫素为原料制得。作为妇产科用 定仍沿用大鼠离体子宫法，质量标准落后于国际标准。本试验根据《中国药典》2010年版附录‘缩宫素生物测 定法”和《欧洲药典》7．0【l捌，以及相关文献资料【3．51，通过采用大鼠离体子宫法与HPLC法对合成缩宫素标准品 溶液和国内多个厂家多批原料和制剂的缩宫素效价进行测定，探讨两法测定缩宫素效价的相关性。 1试验材料 MPl00 16导生理信号记录仪(BIOPACInc)；DC．002型离体器官测定仪(南京分析仪器厂有限 systems 公司)：1200型高效液相色谱仪(AgilentTechnologies)。 10822—1，1 10929， 缩宫素注射液10批(A厂家，批号为110812．1，1 10823—1，120203—1；B厂家，批号为l 号为110801，110804)；垂体后叶注射液，2批(B厂家，批号为110701，120120)。 EP缩宫素对照品(0．96 mg·瓶～，600IU·mg一，批号：4．0)；合成缩宫素标准品(中国食品药品检定研究 【基金项目】安徽省食品药品监管系统科研资助项目(项目编号：0004) ．82． 华东地区第十三届实验动物科学学术交流会 26)。 SD雌性大鼠，SPF级，160～240 2方法与结果 2．1大鼠离体子宫法测定缩宫素效价 h，在大鼠子宫 按《中国药典》2010年版二部‘‘缩宫素生物测定法”(大鼠离体子宫法)进行，实验前40 位置两侧皮下注射己烯雌酚油各0．2 mg。实验当日，取选定的大鼠切断颈动脉，放血处死。剖腹取出大鼠 子宫，在子宫分叉处剪下左右2条，取1条将其下端固定于离体器官恒温水浴装置的浴杯底部，上端用线与 生理记录仪张力传感器相连，以描记子宫收缩；蓄养液应调节至32℃～35℃并保持恒温(±5℃)。标准品 和供试品分别按高低剂量组加0．9％氯化钠溶液制成两种浓度的稀释液，高低剂量的比值为1：0．7。调节剂 量使低剂量能引起子宫收缩，高剂量应不致使子宫收缩达到极限，且高低剂量所致子宫收缩应有明显差别， 可用于实验。标准品和供试品高低四个剂量为一组，以SH、SL、TH、TL表示，轮流注入每组4个剂量，重复 应平行线测定法做实验可靠性测验，实验结果可靠者计算效价PT和平均可信限率FL(％)。可信限率FL(％) 不得大于10％。统计计算采用《中国药典》生物统计程序软件BS2000。结果表明供试品溶液与标准品溶液 相应剂量引起的各反应高度相近，在同一组内高剂量引起的反应显著大于