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DNA的生物合成有两种方式:一、复制 二、反转录
一、复制
DNA的复制方式是半保留复制,DNA在复制时, 首先是双螺旋链的解开,然后两条链分别作为模板,在DNA聚合酶的催化下按碱基互补的原则合成两条与模板链互补的新链,以组成新的DNA分子。这样新形成的两个DNA分子与亲代DNA分子的碱基顺序完全一样。由于子代DNA分子中一条链来自亲代,另一条链是新合成的,这种复制方式称为半保留复制。
DNA的复制过程是半不连续复制,DNA双链在进行DNA复制时,双链解开,每一条链各自作为一个模板进行DNA的复制,其中,沿3′→5′模板链合成的DNA单链是按照连续的方式合成,而沿5′→3′模板链合成的DNA单链则是按照不连续的方式合成的,这种复制方式称为半不连续复制。
DNA的复制过程包括起始、延长、终止三个阶段。
起始阶段:
大肠杆菌DNA复制的起点称为ori C,由245个碱基构成,关键是两组短的重复序列,这些序列在细菌中高度保守。DNA复制开始时,DnaA蛋白结合在起始位点处,DnaA使DnaB和DnaC等蛋白复合物进入DNA的熔解区形成前引物化复合物,从而解开双螺旋形成单链模板,引物酶结合于模板上开始合成引物。
延长阶段:
DNA前导链的合成开始于由引物酶合成的一段RNA小片段,在DNA聚合酶III的催化下,按照从5′→3′的方向,将与模板DNA对应的脱氧核苷酸不断加到引物RNA或前面合成的DNA片段的3′-OH上,直到合成结束。
随后链的合成是以合成冈崎片段的方式完成的,首先合成RNA引物,随后在DNA聚合酶III的催化下,将脱氧核苷酸依次以3,5-磷酸二酯键的形式连接到RNA引物或前面合成的DNA片段的3′-OH,使其不断延长。
终止阶段:
当后面一个DNA片段的合成进行到与它前面的一个冈崎片段的RNA引物相接时,延长作用停止。
①DDDPI引物切除。
②DDDPI聚合酶活性填补缺口。
③DNA连接酶将DNA片段连接起来,形成完整的DNA分子。
二、反转录:以RNA为模板指导DNA的生物合成过程。
RNA的生物合成有两种方式:一、转录 二、复制
一、转录:指以DNA单链为模板,在RNA聚合酶的催化下,以四种NTP为原料,合成RNA的化学过程。
转录作用可以分为RNA聚合酶与模板结合、启始、延长、终止四个阶段。
(1)RNA聚合酶与模板结合
转录作用是从DNA模板的特有位点开始的,细胞开始转录时,RNA聚合酶凭借其(′-亚基的带正电荷特性,借净电作用结合在DNA链上
(2)起始
聚合酶结合在DNA模板上之后,通过扩散寻找启始位点, 聚合酶借助于(因子首先找到-35区,然后向下游移动到-10区,双链解开形成局部单链,在起始位点(+1)接上第一个核苷酸。通常是pppG。
(3)延长
起始作用完成之后, (因子从全酶上释放出来,由核心酶催化其后续RNA的合成,延长的方向是从5′→3′。
(4)终止
当转录进行到终止位点时,RNA的延长作用停止。最简单的终止信号是一段富含GC的回文区域及随后的一段AT序列。对应于此区段的RNA可以形成一个富含GC碱基对的发夹结构及一段富含U的区段,由于U-A碱基对间的作用力弱,有利于RNA链从模板上解离,终止其合成 。但不是所有的终止位点都有这种结构,对于没有这种结构的RNA合成的终止,需要借助于专门的终止因子(的作用, (因子可以与RNA聚合酶结合,使聚合活性转变成水解酶活性,使RNA链从模板上释放,终止合成 。
二、复制:以RNA为模板指导合成RNA的过程。
蛋白质的生物合成:翻译
翻译:mRNA生成后,要将mRNA的信息具体变成蛋白质中氨基酸排列顺序,由于这种将mRNA的信息变成蛋白质中氨基酸排列顺序的过程如同将电报密码译成文字一样,因此通常将这种蛋白质的合成过程称为翻译。
翻译可分为三个阶段:起始、延伸和终止阶段。
合成方向:从肽链的N端到C端依次加上氨基酸。
起始过程:
1.30S亚基与mRNA的结合
30S亚基不能单独与mRNA结合,需要起始因子(IF3)的参与。
2.30S-IF3-mRNA复合物与起始tRNA的结合
甲硫氨酸与tRNAf结合形成Met-tRNAf,再由甲酰四氢叶酸将甲硫氨酸的-NH2甲酰化,形成fMet-tRNAf。由于起始密码子在30S-IF3-mRNA复合物的P位,所以起始tRNA在IF2的帮助下,进入P位。
3.70S起始复合物的形成
30S -IF3 -mRNA
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