γ-干扰素体外诱导大鼠脾脏树突状细胞IDO表达的实验研究.pdfVIP

· 基础研究 · 2009年4月第47卷第l2期 干扰素体外诱导大鼠脾脏树突状细胞IDO表达的实验研究 张 晶 徐 钧 ： (1．山西医科大学 ；2．山西省人民医院普通外科，太原O300l2) 摘【要】目的 探讨 干扰素(IFN一 )诱导大鼠脾脏树突状细胞(Dc)的吲哚胺2，3一双加氧酶(1D0)的表达情况。方法 大 鼠脾脏分离培养 Dc，进行形态特征观察，流式细胞术检测 Dc的表型及确定其纯度。分别用不同浓度的IFN一 诱导作用 Dc后 ，荧光定量 RT—PcR测定 IDOmRNA的相对表达水平。结果 大鼠脾脏分离培养的Dc纯度可达80％以上，培养 l0Id 的Dc具有典型的树枝状突起，cD80、cD86的阳性表达分别达75％、9O％以上。ID0mRNA的表达水平随 一 的浓度的 增大逐渐增加。结论 IFN一 在体外能诱导大鼠脾脏Dc的ID0表达。 关【键词】树突状细胞；吲哚胺一2，3一双加氧酶； 干扰素 中【图分类号】R322．1 文【献标识码】A [文章编号】l673—9701(20o9)l2-48-o3 Study0f —hIte柙er0n—hIducedExpressionofIndole舢血Ie2，3-Ⅸo gle— nase0fRatSpleen—deri、 dDendriticCeUsinVI．tr0 缀 ANG J XU J 1．shanxiMedicineunivers ；2．GeneralsurgeryofshanxjPmvincePeople’sH0spital，rIyuan030ol2 A【bstractl0bjectiveT0studymee ct0f 一inte mn(IFN一一y)啪 tlleindoleallline2，3-di0xy nase(ID0)expIession inrat spleen—deriveddendriticce1ls(Dc)．MethodsDcwereis0latedandcultlJred m spkenirImt．Them 。 ofDc0bservedby micmphot0 印h．Ihepurityandphenotypewereana1yzedwitllnowcytome廿y．Sepamtelywitlldi珏rentc0leen ati0nsoflFN一 inducedDC， relaIiveexpression0fID0mRNA weredetectecbynu0rescenceqllantitativeRT-PcR．ResⅡlts11lep ty0fcultllredDCsab0ve8o％．DCs cul￡ureda￡10dayswih【￡ypicaldendIi￡icmo王phog)r． eposjveexpressi彻 0fCD8OafldCD86we陀 moretllan75％ 柚 d90％．Exp玎ess∞sof ID0mRNA tllt}leconcentmtion0fIFN一 increasedgraduallyincrease．C0nIcl瞰Ii0nlFN一 c伽ldinducetlIeexpressi0nofIDo0frat spleen—derivedDCinvitm． IKeyWords】Dendriticcells；Ind0kamine2，3一di0xygenase； 一inte mn 树突状细胞(Dc)是机体内功能最强的抗原提呈细胞 ，不仅 抗大鼠0x62购 自英国AbD semtec公司 ，PE标记 的抗大 鼠 参与对外来抗原的免疫反应，而且在诱导免疫耐受中也起着重 cD8O、FIrI’c标记的抗大鼠CD86购 自美国eBioscience公司。反 要的作用。Dc可通过多种机制诱导免疫耐受。最近有研究表 转录试剂盒购 自FeⅡnentas公司，ID0与 B一 tin引物和TaJqMan 明，Dc还可能通过产生吲哚胺 一2，3一双加氧酶(ID0)来降低T 探针由上海基康生物技术有限公司设计。 淋巴细胞活性、抑制T淋巴细胞增殖 】，诱导免疫耐受。因此， 1．1．2