一个热诱导穿梭表达载体的构建及其在链霉菌中的应用.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’() * ! +( *# 年 月 $%%$ !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 ,-). $%%$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 一个热诱导穿梭表达载体的构建及其在链霉菌中的应用 ， ， ! ! $ 0 ! $ 陶美凤 周秀芬 4(F8B G5B5H 邓子新 ! （华中农业大学农业部农业微生物重点实验室，武汉 #0%%% ） $ （上海交通大学I(/J 生命科学研究中心，上海 $%%%0% ） 0 （ ， ， ） ,(K? L??5B M5?DH5 +(HNEK O G 摘 要 为探索大肠杆菌 噬菌体表达调控元件在链霉菌中的应用，构建了一个链霉菌 大肠杆菌穿梭表达载体 ! / ，并将来自链霉菌 的聚酮合酶（ ）基因置于其中的 噬菌体启动子 下游，得到表达 的穿 PQR!%% 7S/%% TGU ! 34 TGU 梭质粒PQR!%1 。与在大肠杆菌中一样，该质粒在变铅青链霉菌中也受热诱导表达 !%%VW 的TGU 蛋白；表达的TGU 蛋白可由 和 实验检测到。 在链霉菌中的热诱导表达表明，构建的载体也能用于链霉菌 UWU/TXY: Z5BD5H?/F)(D TGU 诱导表达外源基因。 关键词 链霉菌 大肠杆菌穿梭表达载体，热诱导， 噬菌体启动子， / ! TGU 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） [ X !%%%/0%1! $%%$ %#/%#$%/%# ［］ 霉菌 1 在链霉菌表达载体中，最常用的有依赖硫链丝 7S/%% 的$ ]VF TGU 基因 ，经高温诱导，可在 ［］ ［］ 菌素诱导启动子（ ）的载体 和 ! 大肠杆菌中超量表达TGU 蛋白 。用 .+7Q 酶切 3/#56 PL