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人血清TG、TM抗体放射免疫.doc
人血清TG、TM抗体放射免疫
测定试剂盒
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TG、TM-RIA Kit
说 明 书
[临床意义]
甲状腺球蛋白(TG)和甲状腺微粒体(TM)均为甲状腺滤泡内成分,血液中极微,但在某些因素影响下,它们溢出甲状腺细胞进入血液循环,从而引起自身免疫反应,产生相应的抗体(TGA、TMA)对甲状腺滤泡产生破坏作用。测定血清中TGA、TMA的临床价值,主要用于对慢性淋巴细胞性甲状腺炎的诊断和鉴别诊断,这类疾病绝大多数的演变过程是初期表现为甲亢,后期为甲减,其TGA的阳性检出率约在80%,TMA的阳性检出率则在70-100%。这些病人在作手术治疗和放射性碘治疗时要谨慎,他们很可能发生永久性甲低。另外约有50%左右的Graves病人的TGA和TMA也可检出阳性。
[测定原理]
本测定盒利用人血清中TG、TM抗体与其示踪物(125I-TG、125I-TM)特异结合反应,形成(125I-TG-Ab或、125I-TM-Ab复合物,然后加入羊抗人IgG(分离剂)溶液,离心后复合物被沉定,而游离的示踪物留在上清液中,弃上清液,测定沉淀物放射性,即能反映血清中TG抗体,TM抗体的浓度。
本测定盒血用量少,定性测定,直接加样,操作简例、快速。
[药盒组成及配制]
1、125TG(红) 1瓶。使用时用 ml蒸馏水溶解
125TM(红) 1瓶。使用时用 ml蒸馏水溶解
2、零血清 1瓶。0.5ml
3、阴性对照血清 1瓶。使用时用0.2ml蒸馏水溶解。
4、阳性对照血清 1瓶。使用时用0.2ml蒸馏水溶解。
5、缓冲液 1瓶。
6、分离剂(蓝) 2瓶。10ml/瓶(使用前摇匀)
[操作方法]
实验方法:试管编号,按下表程序幕操作。
操 作 表
NSB(μl) 阴性血清管(μl) 阳性血清管(μl) 样本管(μl) 1
2
3
4
5
6
零血清
阴性血清
阳性血清
样本
缓冲液
125I-TG或
125I-TM 10
-
-
-
500
100 -
10
-
-
500
100 -
-
10
-
500
100 -
-
-
10
500
100 7 混匀,37℃温育45-60分钟 8 分离剂(μl) 100 100 100 100 9、混匀,室温(18-30℃)放置30分钟。
10、任取三管测总T(cpm)。
11、离心(3500转/分)15分钟,吸弃上清液。
12、测各管沉淀的放射性计数(cpm)。
[数据处理]
Bi(样本管cpm)-NSB(零血清cpm)
TG或TM抗体结合率%= ×100
T(cpm)-BG(本底cpm)
[正常参考值]
阴性:TG抗体结合率〈30%
TM抗体结合率〈15%
[注意事项]
样本采集后,应立即分离血清,贮存于2-8℃冰箱内,如一周内不予检测,则需冰冻保存。未经分离的样本在4℃下抗体效价急剧下降。
阴、阳性对照血清清溶解后,即分装于欲测定的试管内(每管10u1)封口贮存于冰冻条件下,临用时逐套取出,否则对照血清因溶液体积小,极易挥发。
[文献报道]
TM-Ab 95%的AIT患者及50%左右的甲亢患者结合率15%,而其它一般非自身免疫甲状腺病大多数TM-Ab结合率15%。
有很大一部分原发性甲低可具有高水平TM-Ab,亚甲炎可出现短暂的一过性TM-Ab阳性。
80%左右的AIT患者和60%左右的甲亢患者可检出TG-Ab,也有患 者TG-Ab阳性而TM-Ab阴性。
深圳拉尔文生物工程技术有限公司
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