人正常肾组织全长cDNA文库的构建及鉴定.pdfVIP

第2 5 卷第3 期 西 安 交 通 大 学 学 报 （医 学 版 ） ol 25 o 3 2 0 0 4 年6 月 Journal of Xian Jiaotong University（Medical Sciences ） Jun 2004 人正常肾组织全长cDNA 文库的构建及鉴定 成 瑜，李 旭，陈 葳，赵 乐，杨玉琮 （西安交通大学第一医院医学实验中心，陕西西安 7 10061） 摘要：目的 构建人正常肾组织的cDNA 文库并鉴定文库质量。方法 运用 mRNA 5 末端的模板转换方法以 powerscript 逆转录酶进行转录，在mRNA 的5 末端添加一段5 -oligo 做为延伸后的模板，从而富集全长cDNAs 。扩增 后的cDNAs 经sf i 酶切、柱层析洗脱，重组于 TripIEx 载体并包装