高效清相色谱法测定水果中防霉剂TBZ%2cOPP%2cDP的残留量.pdfVIP

LC．13l 高效液相色谱法测定水果中防霉剂 TBZ，OPP，DP的残留量 葛宝坤高健会杨秀丽 (天津卫生检疫局塘沽300456) 1前言 涕必灵(TBZ)、邻一苯基苯酚(oPP)、联苯(DP)能够抑制霉菌生长繁殖，防止水果在 生长、存储、运输过程中腐烂变质．因此在国内外水果保鲜方面被广泛地应用…。但水果 中残留的防霉剂对人体具有一定的毒性，主要是浸害人体的肝脏、神经系统和骨髓啪。日 本文献91指出。它们对实验动物有明显的致膀胱癌的作用。铡定防毒荆的方法有HPLc法、 oC法”1及紫外分光光度法”1。上述方法大多是单一成分的测定。虽有DP，OPP和’rBZ 同时测定的Gc法报道，但存在操作复杂、灵敏度不高等问题．本文介绍了采用紫外(uv)、 荧光(FL)双检测器，同时测定TBZ，OPP。DP的}弹Lc方法．操作简单、快速、灵敏， 为水果中3种防毒剂的测定提供了可靠的分析方法． 2材料与方法 2．1仪器与试剂 whce璐高效液相色谱仪：486紫外检测器，470荧光检测器，5lo泵，8lo工作站，纯水器， 超声波发生器，抽滤系统，减压蒸馏装置。甲醇(|玎，Lc纯试剂)，乙酸己酯(AR)，无水 硫酸钠(AR，550℃，4b)，O．05Inol／L氨水溶液。 2．2 TBz，OPP，DP标液制备 取一定量的TBz，OPP，DP，用甲醇溶解定容，作为储备液。再分别取一定量的储 用液。 2．3实验方法 称取经匀浆后的样品10．09，加无水硫酸钠109。研匀，放入250mL具塞三角瓶中。 分别用30，20，20nlL的乙酸乙酯提取3次，每次振摇2mill．合并提取液，过滤，在40℃ 下减压蒸馏至近干。残渣用甲醇溶解并定容至5mL，经O．45pm的滤膜过滤后进样。用 紫外检测器检测DP，同时用荧光检测器检测TBz和oPP，根据保留时间(囊)定性，峰面 积定量。 2．4色谱条件 AuFs=0．32．荧光检测Ex=300nm，Em_360哪。 3结果 3．1检测波长的确定 ．290． 钡0定TBZ和oPP。 3．2色谱图制备 在上述色谱条件下，紫外检测器检测DP，同时荧光检测器检测’rBz和oPP．810工 作站给出紫外和荧光双检测器检测3种加标成分在香蕉样品中的叠加色谱图，见图l。 2．O 4．0 6．O 80mm 图1 3种防霉剂成分的样品叠加色谱田 1．TBZ(2．18m．n)，2．OPP(3．14min)．3．DP(7．78m．m)． 3．3工作曲线制备 按上述实验方法，在系列样品中进行不同浓度的加标回收。经测定，1Bz在O．2～2 均在0．998以上，符合分析方法要求。 3．4最小检出量和最低检出浓度 在本法色谱条件下，将一定浓度的标液进行连续稀释后加标回收。据2倍噪音的峰响 浓度分别为TBz：0．05n魄，OPP：O．25n眺，DP：30n魄。 3．5回收率和精密度测定 分别在香蕉、柑桔、猕猴桃样品中分别添加0．5，1．5倍于国际标准的3种防霉剂， 依法进行测定，其样品回收率和精密度见表1． 4讨论 OPP，检测过程中不需要更换柱子和检测器。另外，由于FL的使用，使TBz和OPP的 检测灵敏度提高一个数量级，故本法具有简便、快速、灵敏的特点。 (2)由于温度对溶液的荧光强度有明显的影响”1，所以在本法操作过程中．应保持操作 温度的基本恒定，一般在常温下操作，即可保证足够的灵敏度，处理的样品也应尽快分析。 采用40℃下减压蒸馏方法，以减少待测成分的损失。 ．29l- (4)在水果样品中，可能存在柠檬黄等天然色素，在本法色谱条件下，其保留时间均小 于最先出峰的TBz(fR=2．19min)，所以该色素成分不干扰3种防霉剂的测定。 (5)本法与文献【6】报道的美国FDA的sOP分析方法比较，无论从流动相组成、波长选 择、灵敏度、峰形及保留时间等方面经统计学处理，二者差别无显著性。 (6)在国外有关防霉剂标准中，美、加、以、日等国规定，柑桔类TBz≤loug，g，OPP ≤10 ug，