第十二章 蛋白质合成.pptVIP

中心法则 第一节 蛋白质的合成体系 蛋白质的合成要求100多种大分子物质参与和相互协作，这些大分子物质包括mRNA、许多tRNA、核糖体、多种活化酶和各种蛋白质因子。 mRNA的碱基序列是如何翻译成蛋白质的氨基酸序列？ 遗传密码：DNA（或其转录的mRNA）中的碱基序列和蛋白质序列之间的对应关系。 1954年物理学家G. Gamov首先对遗传密码进行探讨。 4种核苷酸构成序列( mRNA)→ 20种基本AA构成序列(蛋白质) ？ 一对一的对应关系，× 42=16， × 43=64，足够 1961年Francis Crick及其同事的遗传实验进一步肯定mRNA上相邻三个碱基编码一个氨基酸， 此三联体碱基称为密码子(codon)。 64种密码子和20种氨基酸之间的相互关系是什么？ 1961年美国科学家Nirenberg等用大肠杆菌无细胞体系，外加20种氨基酸的混合物（其中有一种氨基酸被同位素标记）及poly U，经保温反应后，得到了被标记的苯丙氨酸的多聚体，证明UUU是编码phe。同样证明CCC编码pro ，AAA编码lys 。这三个密码子最早被解译出来。 Nirenberg和Ochoa等又进一步用两种核苷酸或三种核苷酸的共聚物作模板，重复上述实验。 到1966年就全部破译了64组密码子 密码的无标点性：指两个密码子之间没有任何核苷酸加以隔开。 若插入或删去一个碱基，就会使这以后的读码发生错误，这种突变称移码突变（frame-shift mutation）。 （2）遗传密码的不重叠性 密码子的简并性:指大多数氨基酸都是由几个不同的密码子编码的，如UCU，UCC，UCA，UCG，AGU及AGC 6个密码子都编码丝氨酸。 同义密码子（synonymous codon）：编码相同氨基酸的密码子。 只有Met和Trp仅有一个密码子 。 一是可以减少有害的突变。 假如每种氨基酸只有一个密码子，那么剩下的44个密码子都成了终止密码子，一旦某氨基酸的密码子发生单碱基的点突变，则很可能造成肽链合成的过早终止。 二是既使DNA上碱基组成有变化，仍可保持由此DNA编码的多肽链上氨基酸序列不变。如GUN编码Ala，由于简并性的存在，不论第三位的U变成什么，都仍然编码Ala。 密码子的专一性主要取决于前两位碱基，第三位碱基的重要性不大 如丙氨酸由三联体GCU，GCC，GCA和GCG编码 (5)起始密码子和终止密码子 64个密码子中，有1个密码子AUG既是甲硫氨酸的密码子，又是肽链合成的起始密码子（initiation codon）。 另外3个密码子UAG，UAA，UGA不编码任何氨基酸，而是多肽合成终止密码子（termination codon）。 密码子在高等、低等生物中基本是完全通用的。 但有例外情况， 如哺乳动物的线粒体中，UGA不再是终止密码子，而编码色氨酸；AGA、AGG为终止密码，而不编码精氨酸。 支原体中UGA不作终止密码，而是编码色氨酸。 原生动物鞭毛虫把终止密码子UAA和UAG 读成谷氨酰胺 二、tRNA （transfer RNA） 在蛋白质合成中，氨基酸本身不能识别mRNA上的密码子，它需要由特异的tRNA分子携带到核糖体上并由tRNA去识别在mRNA上的密码子。 tRNA的两个关键部位 一个是氨基酸结合部位 另一个是与mRNA的结合部位 氨基酸羧基与tRNA3?末端腺苷的核糖3?-OH连接，形成氨酰-tRNA（由特异的氨酰-tRNA合成酶催化）。 同功受体tRNA（isoaccepting tRNA）：携带相同氨基酸而反密码子不同的一组tRNA（大多数氨基酸都有几种tRNA运载） 在书写时，将所运氨基酸写在tRNA的右上角，如tRNAAla及tRNAcys分别表示转运Ala和cys的tRNA 一种氨酰-tRNA合成酶可以识别一组同功受体tRNA。 与mRNA的结合部位 位于tRNA的反密码子环上，由3个特定的碱基组成，称为反密码子（anticodon） 反密码子按碱基配对原则反向识别mRNA链上的密码子，而把所带的氨基酸送到肽链的一定位置上。 是蛋白质合成的场所。 标记各种AA，注入大鼠体内，在不同时间取出肝脏，匀浆，离心分离各种亚细胞器，分析放射性蛋白的分布，证实蛋白质的合成是在核糖体上进行的。 游离核糖体：合成细胞质蛋白。 内质网核糖体：合成分泌蛋白和细胞器蛋白。 核糖体是由核糖核酸（rRNA）和几十种蛋白质分子（核糖体蛋白）组成的一个巨大的复合体。 每个核糖体是由大小两个亚基组成，每个亚基都有自己不同的rRNA和蛋白质分子。 rRNA rRNA有大量的茎环（发夹）结构，形成核糖体的刚性骨架。 功能： （1）蛋白质合成的施工平