动物细胞多方法规模性培养技术综述.pdfVIP

№. 3 　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　陕西科技大学学报 　　　　　　　　　　　　　　　　　　J un . 2005 Vol . 23 　　　　　　J OU RN AL O F SHAAN XI UN IV ER SIT Y O F SCIEN CE T EC HN OL O GY 　　　　　 ·117 · ( ) 　文章编号 :1000 - 5811 2005 03 - 0 117 - 05 动物细胞多方法规模性培养技术综述 田三德 ,李成涛 ( 陕西科技大学生命科学与工程学院 ,陕西 咸阳　7 12081) 摘 　要 :简要概括了近年来国内外动物细胞多方法规模性培养技术的发展状况以及 目前已为 人们确定的主要开发应用技术的种类 、特点及应用范围 ,主要包括悬浮培养 、微载体培养 、多孔 载体培养 、微囊化培养 、中空纤维法培养等 ,指出了细胞培养技术和应用领域 日趋广泛的前景 。 关键词 :动物细胞 ;细胞培养技术 ;发展前景 中图分类号 :Q 813 . 1 　　　文献标识码 :A 0 　引言 动物细胞培养工程作为生化工程学科领域迅速发展起来并具有生物技术与化学工程结合特色的新型 工程学 ,无论在其基础研究还是应用研究方面都越来越受到生物技术界的重视 ,现已成为生化工程学科主 要的前沿领域之一 。利用人工培养的动物细胞可以分离和鉴定病毒 ,进行遗传工程 、代谢及其调节方面的 ( ) 研究 ,并能发挥其在表达产物方面的优点 如转录后修饰和产物胞外分泌等 ,生产出许多与人类健康和生 存密切相关的生物技术产品〔1〕。因此 ,细胞培养工程正逐步进行了简要的成为一个独特的高新技术产业 , 并显示出巨大的工业发展前景 。本文对近年来国内外动物细胞多方法规模性培养技术的发展状况以及 目 前已为人们确定的主要开发应用技术的种类 、特点、应用范围和发展方向评述 。 1 　现代动物细胞的培养技术 动物细胞大规模培养技术是建立在贴壁培养法和悬浮培养法基础上并融合了固定化细胞 、流式细胞 技术 、填充床 、生物反应器技术以及人工灌流等技术而发展起来的 ,主要包括悬浮培养 、微载体培养 、多孔 载体培养 、微囊化培养 、中空纤维法等 。 1. 1 　悬浮培养技术 〔2 ,3 〕 少数动物细胞属于悬浮生长型 ,它们在离体培养时不需要附着物 ,只需悬浮于培养液中就可以良好生 长 。该法将采集到的活体动物组织分散 、过滤 、离心、纯化 、漂洗后接种到适宜的培养液中置于特定条件下 进行培养 。 悬浮培养法细胞增殖快 ,产量高 ,设备结构简单 ,有成熟的理论计算 ,可以借鉴微生物发酵的部分经 验 ,放大效应小 ,是动物细胞大规模培养的理想模式 。而且细胞传代时不需要再分散 ,只需按比例稀释即 可继续培养 。但是悬浮培养的缺点是细胞密度较低 ,转化细胞悬浮培养有潜在致癌的危险 ,培养病毒易失 去病毒标记而降低免疫能力 。此外 ,有许多动物细胞属于贴壁依赖性的 ,因此不能悬浮培养 。 1. 2 　微载体培养技术 随着细胞基本培养技术日益成熟 ,一些具有规模性的细胞培养方法应运而生 。对于贴壁性细胞 ,最初 采用在培养液中加入一定数量的小滚瓶以增加细胞生长的贴壁面积 。此方法构造简单 ,成本低 ,重复性 收稿 日期 :2004 - 11 - 27 ( ) 作者简介 : 田三德 1954 - ,男 , 陕西省旬邑县人 ,教授 ,研究方向:细胞工程的研究与应用 ·118 · 陕西科技大学学报 第 23 卷 好 ,放大过程可依靠增加滚瓶数量来完成 ,因此简单易行 。但该法由于劳动强度大以及滚瓶空间大而提供 面积有限、相对细胞产率较低 、监控不便等不利条件限制了它的进一步发展 。 ( ) 1967 年 ,凡 ·维茨尔 Van Wezel 开发了微载体系统培养贴壁细胞技