单克隆抗体的特异性鉴定.pdfVIP

　 J ou rnal of N anj ing A g ricu ltu ral U niversity 　　　 - 单克隆抗体的特异性鉴定 H Y 王建英　牛树理 　蓝邹然 (南京农业大学动物科技学院, 南京 210095) Spec if ic ity of m onoclona l an tibod ies aga in st - the H Y an tigen W ang J ianying, N iu Shu li and L an Zou ran (Co llege of A n im al Science T echno logy, N an jing A gric U n iv , N an jing 210095) 抗原是存在于细胞膜的一种糖蛋白, 属于次要组织相容性抗原, 在哺乳动物中是雄性特异的基 H Y [ 1 ] 因表达产物 。 抗原的发现, 引起了关于 抗原对精子选择和胚胎性别鉴定的广泛研究。无论是 H Y H Y 应用免疫技术分离 精子与 精子, 还是进行胚胎的性别鉴定, 都必须依赖高纯度、高效价的特异 X Y H Y 抗体, 因此 单克隆抗体的研究引起人们的普遍关注。本文对 单克隆抗体杂交瘤细胞株 的 H Y H Y H Y2 特异性进行了研究。 1　材料和方法 11　细胞与实验动物 ( ) 　　单克隆抗体杂交瘤细胞株 , 由南京农业大学家畜繁殖研究室制备 另文发表 。 纯系小 H Y2 BALB C 鼠, 购于南京医科大学实验动物中心。 12　主要仪器设备 CO 2 培养箱, 美国 Sheldon M anufactu ring Inco rpo ration; D G 5030 型酶联检测仪, 华东电子管厂; 倒 置显微镜, 成都光学仪器厂; 96 孔和 24 孔细胞培养板, 日本CORN IN G 公司, 40 孔 EL ISA 板, 上海华 美公司产品。 13　单克隆抗体的制备 131　有血清培养上清液　将杂交瘤细胞 2 株扩大培养后, 每隔 3 收集一次上清液, 4 000 离 H Y d r m in 心 10 m in , 上清液- 20 ℃保存。 132　无血清培养上清液　收集对数生长期的杂交瘤细胞, 离心后用