双基因重组质粒及其应用.pdfVIP

科技情报开发与经济 SCIT／ECHINFORMATIONDEVELOPMENT＆ECONOMY 2005年 第 15卷 第 8期 文章编号：1005-6033(2005)08--0135--03 收稿 日期：2005--03—17 双 基 因重 组 质 粒 及 其 应 用 程小兵 ，张虎生，梁爱华 (化学生物学与分子工程教育部开放实验室，thug大学生物技术研究所，山西太原，030006) 摘 要：近年来，随着生物工程技术的发展，-JJ3已成功地将两种不同 目的蛋 白的基因 构建于同一表达载体。这种双基因载体的构建克服了单一 目的基因表达载体的不足， 已在农业、医药和生物工程基础理论研究中得到广泛应用。 关键词：双基 因；重组质粒；基因工程 中图分类号：Q343．1 文献标识码：A 1 双基因重组质粒 promoterl genel promoter2 gene2 随着基因工程技术的发展，人们 已不满足于构建具有单一基因能表 一 一 一 一 一 一 一 一 一 — — — — — — — — — — — — — — — — 达单一蛋白的载体，而更青睬于构建具有双基因、能同时表达两种蛋白 ∞ d promoterl genel gene2 promoter2 的双基因重组质粒。双基因重组质粒被广泛应用于农业 、医药和生物工 程基础理论研究。双基因通常指通过人为的遗传操作构建在同一个载体 (如质粒)上表达的两个基因。一般说来，这两个基因不是相同序列的两 个基因，而是串联在一起表达的两个 同样的基因，称之为同一基因的双 拷 贝。 ．‘一一一一一一一一一 一一一一一一一一一 2 双基因重组质粒的种类 pmmoterl genel gene2 已报道的双基因重组质粒有以下几种类型： 第一类是双启动子类 ，即两个 目的基因均有各 自的启动子。有以下 几种情况：其一，启动子一第一基因一启动子一第二基因(图la)；其二。 启动子一第一基因一第二基因一启动子(图lb)；其三，第一基因—启动 ( ATG1stciston ISD2 子一启动子一第二基因(图 1c)。在以上各种情况中，两个基因均能在各 0) 自的启动子下启动转录并表达。 图1 双基因重组质粒的类型(箭头为转录方向) 第二类是单启动子类，文献报道最多，大多是 以下模式：启动子一第 一 在其后面接上 目的基因，当第一个基因翻译以后，核糖体并不脱落 。接着 基因一第二基因(图 1d)。其特点是两个 目的蛋白基因在 同一个启动子 控制下进行转录并表达融合蛋白。为防止发生移码突变 ，保证这两个基 翻译第二个基因；因此如果第一个基因能高效表达，则第二个基因也能 因能在同一个阅读框 内，常常要进行一些基因操作。