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移至培养液中,保存在25—37嘲1q境下,如室内温度偏低,可置于加温摇床振荡。
7、受体处理:在受体子宫角末端用回形针刺个小孔,扦人冲洗套管移植针,注入器依次
抽取培养液lral,胚胎移植液2rrd,再吸培养液lml,根据形态选择移植与供体同一移植部位。
8、术后护理及孕期监测
供试犬术后抗感染治疗。第8天拆线。妊娠第30日龄运用3.5赫兹凸头扇形B超腹部
扫查,观察胚胎生长发育情况;第40日龄x光透视可见胚胎脊柱。第59天对供体和受体行
剖腹产术,分别于供体犬右侧子宫角取出话仔3公5母,平均体重0.8斤,左侧子宫角未受
孕。受体犬左侧子宫角取出活仔1公2母,平均体重0.85斤。右侧子宫未孕。
9、影响胚胎移植的因素
9.1正确判断胚胎质量是胚胎移植成功与否的关键。常用的方法是形态标准。胚胎移
植应取桑椹胚阶段,此时能辩别出细胞形态。技术要领在于采卵时间的选择,发育到囊胚
阶段则看不清细胞形态,突出透明带,此时不宜移植,桑椹胚和囊胚对受体是有选择性的。
总体结构不正常、退化或破碎的胚胎以及空透明带者均应剔除。
9.2供体胚胎日龄与受体妊娠率有关,胚胎采集和移植的期限不能超过周期黄体的寿
命,不同品种犬卵巢黄体的变化略有差别。最迟在周期黄体退化之前23天内完成,犬桑椹
胚移植效果较好。冲洗液和培养液是同一物质,多用于PBs(含灭活犊牛血清磷酸盐缓冲
液),只是使用于不同的阶段。为避免体外因素对胚胎的影响,胚胎冲出后应尽快检出,冲
洗液应保持在37℃恒温条件下,回收的液体不能低子30℃。
9.3移植技术的熟练程度也很重要,移植过程中不能刺激和损伤生殖腺、生殖管道。移
植时要采取三段法(即两头空。中间是胚胎),带人的液体越少越好,最好不要带人气泡,根
据供体胚胎在子宫角内所处的部位,决定受体的移植部位。胚胎从供体犬取出后在体外停
留时间的长短与移植成功率有关,持续时间延长。胚胎活力下降。
9.4营养状况良好的供体可获得高质量的胚胎。供体犬的年龄不同卵的质量也不同。
成年母犬和处女母犬的胚胎分别移植到成年母犬体内,其得到的仔犬比率为成年母犬高于
处女犬。犬子宫移植比输卵管移植简单,成功率也高。犬没有辖卵管伞.进入桑椹胚阶段
的受精卵在输卵管下部,子宫角上部,因此,适宜采用下行性灌流法。
9.5无论人工诱情还是自然发情的犬,供体和受体的选择应该是第二次性周期的犬,这
样的犬子宫内环境稳定,适于移植胚胎的生长发育。
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犬胚胎移植手术路径的可行性探讨
作者: 董君艳, 谢伟东, 娄红军
作者单位: 公安部南京警犬研究所
引用本文格式:董君艳.谢伟东.娄红军 犬胚胎移植手术路径的可行性探讨[会议论文] 2005
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