《植物组织培养》复习题.docVIP

植物组织培养复习题 名词解释： 1、外植体：由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官。 2、愈伤组织：指在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。 3、脱分化：已分化的细胞在一定因素作用下重新恢复分裂机能并改变原来的发展方向而沿着一条新的途径发育的过程。 4、再分化：脱分化的细胞团或组织经重新分化而产生出新的具有特定结构和功能的组织或器官的一种现象。 5、胚状体：指在组织培养过程中，由植物体细胞所形成的类似于合子胚的结构。它具有根、茎结构，能够一次性形成再生植株。 6、N6培养基：是1974年朱至清等为水稻等物花药培养而设计的。其特点是成分较简单，KNO3和（NH4）2SO4含量高。为了避免每次配制培养基都要对几十种化学药品进行称量，将培养基中的各种成分，按原量10倍、100倍或1000倍称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做母液。这样，每次配制培养基时，取其总量的1/10、1/100、1/1000，加以稀释，成培养液。 4、不定芽产生的途径有外植体上直接产生和由外植体诱导的愈伤组织上产生。 5、生物脱毒的方法有茎尖分生组织脱毒法、愈伤组织脱毒法和微体嫁接离体培养脱毒法。 6、植物基因转化的方法有农杆菌介导法、基因枪转化法和聚乙二醇介导法。 7、种质保存的方法有原地保存和异地保存。 8、常用培养基有MS培养基、N6培养基和怀特培养基等。 9、植物组织再生的途径有胚状体途径和细胞途径。 10、叶培养时叶片腹面向上放置利于芽的分化。 问答题： 1、MS培养基的基本成分。 答：①糖的作用：提供碳源（能源）； ②活性炭作用：吸附有害物质、不易褐化、有利生根等； ③PH值5.6-5.8左右； ④激素种类及其作用： a.生长素类：诱导细胞的分裂和根的分化； b.细胞分裂素类：促进植物细胞的分裂和不定芽形成打破顶端优势形成丛生芽，有利于芽的增值，常用于继代培养和增值培养； c.2,4-D、NAA:诱导愈伤组织； d.IBA:诱导生根； e.细胞分裂素和生长素的比例高时，产生芽；比例低时，产生根。 2、培养基的配置过程？ 答：（1）母液的量取及培养基的配制：①根据需要配置的营养基体积，计算所需药品及水的用量，称取所需的蔗糖、琼脂放于烧杯中；②量取一定量的去离子水或者是自来水，一般是培养基量的80%-90%，加入到搪瓷锅或不锈钢锅内并加热，然后吸取母液；③母液的吸取量应根据母液扩大倍数和每次配置营养基的量，计算出每次吸取母液的量；④按照大量元素、微量元素、铁盐、有机物、生长调节物质母液的顺序编号置于操作台上，按顺序量取各种母液放于另一烧杯中；⑤水开后，加入蔗糖和琼脂，不断搅拌，防止粘锅底，直至琼脂全部溶解位置。；⑥将量取好的各种母液倒入上述已加热的锅中，不断搅拌，使其均匀溶解；⑦为了精确定容，可先在标准温度下定容，然后在培养基熬煮好的温度下找到对应的刻度，并以此刻度进行定容。 （2）调整培养基的pH值：用酸度计测试，准确度高，对精密实验等研究工作有利；用精密pH试纸，可用于育苗和生产工作。 （3）培养基的分装：要趁热分装，一般每瓶40mL或100mL左右；用棉塞或封口膜等封口，用线绳或橡皮筋捆扎，及时做好标记。 （4）培养基的灭菌和保存：用高压灭菌锅在1.1~1.2kg/cm2条件下维持15~20min即可灭菌；让培养基自然冷却至凝固后置于10oC以下保存，含生长调节物质的培养基在4~5oC黑暗处保存更为理想。应注意培养基应在2周内用完。 3、常用灭菌技术。 答：物理灭菌：（1）热力灭菌：最常用的方法包括干热灭菌和湿热灭菌法。①干热灭菌的对象是不含水、耐高温、新器皿工具、污染器皿和用具等。②湿热灭菌的穿透力强、灭菌时间短，也是最常用的一种方法。常采用间歇灭菌和加压灭菌法。a.间歇灭菌的对象是不耐高温（100度）物品或有机溶剂；b.高压灭菌时温度121oC维持20min。 （2）辐射灭菌：常用紫外线/紫外灯灭菌，应注意避免直接在灯下操作。 （3）过滤灭菌：滤膜孔径为0.45或0.20微米。0.45微米滤膜可过滤酶系或小量液体培养基；0.20毫米滤膜除去病毒以外的所有微生物。 化学灭菌：常用的化学灭菌剂有①含氯化合物：常用的为漂白粉、0.1%氯化汞、次氯酸钠，用于物体或外植体灭菌；②过氧化物：3~6%双氧水，0.2%过氧乙酸；③醇类：70%乙醇，用于外植体、皮肤、器皿等；④季胺盐类：0.1~0.5%新洁尔溶液，用于污染物表面；⑤酚类：3~5%石炭酸或煤酚皂，用于喷洒房间或处理污染物表面；⑥醛类：常用甲醛、戊二醛熏蒸房间。 4、花粉培养的意义？ 答：①自交作物育种中，加速纯化和提高选择效率； ②在异交作物中快速获得纯系； ③提高突变育种的效率； ④获得异缘附加系、代换系和易位系。 5、花药培养取材的时间及预处理与灭菌？ 答：取材的关键