蛋白质二级结构红外光谱.pdfVIP

　　　　　华　东　理　工　大　学　学　报 V o l. 23 N o. 4 ·422 · 　　　　　Jou rna l o f Ea st Ch ina U n iver sity o f Science and T echno logy 199708 蛋白质二级结构的红外光谱 周瑞明 (温州师范学院化学系, 温州 325000) 沈永嘉 (华东理工大学精细化工研究所, 上海 200237) 　　提要: 蛋白质的多肽链组成了各种特定的三维空间构象, 氢键在维系这种构造中 起着十分重要的作用。本文通过红外光谱法研究了蛋白质的二级结构和氢键在维系 这种构造中的作用, 发现具有螺旋和折叠构象的多肽链主要以反式构象为特征排布。 关键词: 蛋白质; 红外光谱; 多肽链; 氢键; 三维空间构象 中图分类号: Q 734 　　蛋白质的二级结构是指蛋白质分子中多肽链本身的折迭方式。根据已有的实验证明, 多肽 链的二级结构, 主要是由骨干肽链组成的多肽折迭成规整的周期性的 螺旋、折迭等空间构 象。在这类结构之中, 尚有氢键参加以维持其空间构象的稳定性。 本文应用红外光谱法, 通过离子化效应, 对蛋白质的二级结构及其稳定性和氢键对维持二 级结构所起的表征作用提出一种新的研究方法。 1　实验部分 1. 1　试剂 ( ) ( ) 鸡蛋白 配制 , 试剂明胶、 4 2 2 7 , 化学纯。 N H C r O 1. 2　仪器 ( ) ( IR 7650 型红外分光光度仪 上海分析仪器厂 , ZF 1 型短波紫外分析仪 上海 电光仪器 ) 厂 。 1. 3　实验 ( ) 1 样品调制: 取新鲜鸡蛋白40 , 加蒸馏水 120 , 温热至 30 ° 并搅拌溶解, 通过双层 mL mL C ( ) 丝网 300 目 过滤得均一状鸡蛋白溶液。 (2) 取蛋白溶液在平板玻璃上均匀涂布, 于适当温度下充分干燥成膜, 筛选蛋白膜厚度使 之出现合适红外吸收强度。 (3) 固定蛋 白膜于 KB r 窗片中测 IR 谱, 光谱范围为 4 000～ 650cm - 1 , 光谱分辩率为 4cm - 1。 (4) 取上述鸡蛋溶液 50 , 在避光下加入饱和重铬酸钾溶液 8 , 氨水 0. 5 , 搅拌均匀 mL mL mL 收稿 日期: 第 4 期 周瑞明等: 蛋白质二级结构的红外光谱　　　　 ·423 · ( ) 后用样方法过滤得重铬酸钾盐蛋白溶液。制膜方法同 2 。 ( ) ( ) ( ) 5 在紫外光下 = 254 对同一张 4 2 2 7 蛋白膜分别光照 0、15、30、60、90 nm N H C r O m in 后重复测 IR 谱