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振动切片的免疫反应.doc
振动切片的免疫反应（以下免疫反应在摇床上轻轻摇动）
(免疫荧光标记：
培养板中浸于PBS中的切片
(
振动切片封闭液(PNBS) 室温封闭2hr
(
一抗（稀释过） 4(C 2
(
PBS 室温1hr ( 5
(
二抗-荧光集团（稀释过） 4(C 过夜
(
PBS 室温1hr ( 5
(
贴于载玻片上
(
荧光封固剂封片
(碱性磷酸酶（AP）:
培养板中浸于PBS中的切片
(
振动切片封闭液(PNBS) 室温封闭2hr
(
一抗（稀释过） 4(C 2
(
PBS 室温1hr ( 5
(
二抗-AP（稀释过） 4(C 过夜
(
PBS 室温1hr ( 5
(
显色: AP-CDS 10-30min
???????????(
NBT4.5(l/ml、BCIP3.5(l/ml in AP-CDS 室温或37(C 5-30min
???????????(
TE 室温 10min
(
贴于载玻片上
(
梯度乙醇脱水
(
二甲苯透明
(
中性树胶封片
(辣根过氧化物酶（HRP）:
培养板中浸于PBS中的切片
(
3%H2O2.10% MeOH in PBS RT 3min
(
振动切片封闭液(PNBS) 室温封闭2hr
(
一抗（稀释过） 4(C 2
(
PBS 室温1hr ( 5
(
二抗-HRP（稀释过） 4(C 过夜
(
PBS 室温1hr ( 5
(
显色: HRP-CDS室温20-30min
(
贴于载玻片上
(
梯度乙醇脱水
(
二甲苯透明
(
中性树胶封片
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