利用电压敏感荧光染料测定贝体中的麻痹性贝毒_高利娟.pdfVIP

第 2 9 卷 , 第4 期 　 　　　　　　　　　　　光 谱 学 与 光 谱 分 析 Vol29 ,No4 ,pp 2 0 0 9 年 4 月 　　　　　　　　　　　 　Sp ect ro scop y and Sp ect ral Analy si s Ap ril , 2009 　 利用电压敏感荧光染料测定贝体中的麻痹性贝毒 1 1 , 2 1 , 2 高利娟 , 杨维东 , 刘洁生 1 暨南大学生物工程学系 , 广东 广州 　510632 　　　　　　　　　　　　　 2 水体富营养化与赤潮防治广东省高等学校重点实验室 , 广东 广州 　5 10632 ( ) 摘 　要 　麻痹性贝毒 p aralytic shellfi sh poi soning , PSP 是分布最广 、危害最大的赤潮毒素 , 可阻断钠离子 通道从而抑制动作电位的形成导致动物体中毒 。以膀胱癌移行细胞 T24 为实验材料 , 采用电压敏感荧光染 料 bi soxonol , 根据 PSP 毒素 GTX2 ,3 对藜芦定诱导细胞去极化的抑制作用 , 建立了一种麻痹性贝毒电压敏 感荧光染料检测法 。实验结果显示 , 在 2～100 ng ·mL - 1 范围内, PSP 毒素 GTX2 ,3 可显著改变培养体系的 荧光强度 , GTX 浓度与荧光强度之间存在很好的线性关系 。市售贝类 PSP 毒素检测结果表明 , 此方法测定 结果与小鼠法基本一致 , 但灵敏度更高 , 说明根据 GTX 浓度与荧光强度之间的线性关系可实现对样品中 P SP 毒素的快速检测 。利用电压敏感荧光染料测定贝体中的麻痹性贝毒是一种非常有潜力的贝毒快速筛查 方法 。 关键词 　麻痹性贝毒 ; 荧光染料 中图分类号 : Q9488 , X55 　　文献标识码 : A 　　DOI : 103964/ ji ssn(2009) 的检测 , 特别是 PSP 毒素的快速筛查技术尤为重视 。 引　言 目前国际上有关 PSP 的调查 、检测多采用小 鼠法和 H PL C[4 ] 。小鼠法虽然快捷 , 能给出样品的毒性 , 但需大量 　　近年来 , 全球范围内有害赤潮发生的频率 、规模及其危 的小鼠, 花费大 、耗时、灵敏度低 、假阳性高、受待检样品量 害效应呈现逐渐上升的趋势 , 给人类健康 、水产养殖和海洋 和标准活体动物的限制 , 用于批量样品的检测尚不够理想 。 生态系统等带来严重的危害 。赤潮的主要危害之一是某些赤 H PL C 对样品预处理条件要求很高 , 费用昂贵 , 且标准品问 潮藻类能够产生毒素 , 毒素通过食物链进入贝体内, 人们食 题难以有效解决 , 更重要的不能及时有效 、准确地反映样品 用染有贝毒的贝类后造成中毒甚至死亡[ 1] 。赤潮毒素的毒性 的实际毒性 , 因而也不理想 。 各异 , 根