对结肠癌SW620与LOVO细胞株的杀伤作用观察.pdf

CIK细胞对结肠癌SW620和LOVO细胞株 的杀伤作用观察 要跟东，刘爱民，霍红旗，张灿，王海东 (邯郸市中心医院，河北邯郸056001) 摘要：目的观察细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)对结肠癌SW620和LOVO细胞株的杀伤作用。方法 无菌采集健康人和结肠癌患者外周血，诱导制备CIK细胞。采用流式细胞术检测两者细胞表型。将健康人、结肠 细胞和相同效靶比下健康人来源的CIK细胞的杀伤活性明显高于结肠癌来源的CIK细胞(P均0．05)。结论 健康人、结肠癌患者来源的CIK细胞对结肠癌SW620、LOVO细胞均有杀伤作用。健康人来源的CIK细胞对结肠癌 SW620、LOVO细胞株的杀伤作用更强。 关键词：大肠肿瘤；结肠癌；细胞因子诱导的杀伤细胞；免疫疗法 中图分类号：R735．3文献标志码：B 文章编号：1002-266X(2011)06日盯4蜕 细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)是人外 周血单个核细胞在体外经多种细胞因子刺激后获得 管；分别加入CD；CD未双标记荧光抗体及阴性对照 的一群异质细胞¨’21，其具有增殖速度快，杀瘤活性 各10山，置暗处，4℃标记20min，PBS洗涤2次，然 canto 高，杀瘤谱广的特点。与其他疗法相比，CIK细胞可 后用流式细胞仪和FACS II软件检测细胞表 以在不损伤机体免疫系统结构和功能的前提下，直 型。 接杀伤肿瘤细胞，并可调节和增强机体的免疫功能， 1．2 特别适用于那些已无手术、放疗、化疗适应证的患者 L3,g J。2006年12月一2010年8月，我们分别制备了胞浓度为5×10‘／ml，常规培养。次日待靶细胞贴 健康人和结肠癌患者来源的CIK细胞，观察其细胞 表型并将其作用于结肠癌细胞株Sw620、LOVO，观靶比分别为10：l和20：l。另设靶细胞对照组和单 察其对结肠癌细胞的体外杀伤活性。现报告如下。 独效应细胞对照组，每组均设3个复孔，37℃、5％ 000 1资料与方法 h后离心(1 r／rain，10min)， C02孵箱中培养48 1．I min CIK细胞的制备无菌采集15例健康人和15弃上清，每孔加二甲基亚砜150一。振荡溶解10 例结肠癌患者外周血各20ml，肝素钠(20U／m1)抗 后，用酶标仪570nm处测OD值，计算CIK细胞对 凝。用PBS液l：l稀释，吸管吹打均匀，以2：1的比 例加到淋巴细胞分离液上层，离,C,(400 g，20min)。 胞对照组OD值+效应细胞对照组OD值一实验组 取中间白膜层，置50 100％。 ml离心管中。用PBS液悬浮细OD值)／靶细胞对照组OD值]X 胞，离心(450g，10Inin)。洗涤1次，低速离心(801．3统计学方法采用SPSSl3．0统计软件。组问 g。10rain)洗涤2次。接种l×106／ml上述细胞于 比较采用x2检验。P≤O．05为差异有统计学意义。 培养瓶中，用加入3％人血浆的PAA淋巴细胞培养2结果 000 000 基培养，加入l h后加人l 经14 lj／ml蜊一Y，24 d诱导后，健康人、结肠癌患者来源的 U／mI U／mI IL-2、300 IIJ—l和50ng／ml CD3mAb。每 2—3