基因丢失或失活在肿瘤发生中的作用的研究进展.pdfVIP

遗传 HEREDITAS(Beijing)13(3) 46- 49 1991 综 一 述 基因丢失或失活在肿瘤发生中的作用研究进展 黄建华 吴 吴 （中国医学科学院肿瘤研究所，北京，100021) 在癌变原理的研究中，分子肿瘤学领域取得了令 的致癌作用是以两个正常等位基因全部丢失或失活为 人瞩目的成就，发现了与肿瘤发生密切相关的两类基 特征的，因此在肿瘤细胞中很难直接检出这些基因的 因。第一类是所谓的癌基因原（癌基因），它们是细胞 存在和异常。使用什么策略才能发现肿瘤细胞中丢失 的正常基因，在演化中高度保守，在细胞正常生长和分 了与肿瘤发生密切相关的基因呢？这是一个首先要解 化过程中有着重要的生理功能。但在外界致癌因素的 决的难题。1983年 Cavenee首创了用RF卜F连锁分 作用下，通过点突变、DNA重排和基因扩增等方式使 析的方法用以检测肿瘤细胞基因组等位基因丢失或杂 这些癌基因激活而导致肿瘤发生。在体外的试验 中， 合性消失”〔。在RB的研究中取得了成功，并为研究 用已激活的癌基因去转染特定实验动物细胞，可以使 各种肿瘤基因丢失开辟了新路。 这些受试细胞发生恶性转化。因此，在细胞水平上，癌 限制性片段长度多态性 (RFLP)，是指在基因组 基因的致癌方式是显性的。第二类可称为抗癌基因， DNA中，限制性内切酶识别部位所限定的、在不同个 这是新近在视F1膜母细胞瘤 简（称RB)的研究中所取 体中长度不一致的DNA序列。这些RFLP大多产 得的重大突破。根据某些家族性RB病人在染色体” 生于碱基替代而造成的内切酶位点的得失，一般只能 q14区域出现缺失的线索和用连锁分析所检测到的13 在人群中检测到二种形式即该酶切点有或无2〔,430 q14处存在特异基因丢失的资料，用分子克隆的方法， Cavenee等人所采取的策略为在同一肿瘤息者身上取 在染色体这个区域分离到了RB基因。这是第一个克 肿瘤组织和正常体细胞 如（淋巴细胞），提取基因组 隆到的抗癌基因。对RB基因结构和功能的研 究表 DNA，用某种限制酶消化，通过琼脂塘凝胶电泳将这 明，该基因在RB的发病中起着至关重要的作用。它 些大小不同的酶解片段进行分离，形成一定的分布区 的正常存在与表达能够阻止视网膜母细胞癌变，并促 带，然后用各个已定位在特定染色体的多态 DNA探 使细胞发生正常分化，故被命名为坑窟基因 A‘ntion- 针与其杂交。 以正常组织基因组杂合型 RFLP多态 cogene)或抑癌基因 C（ancerSuppressorGene)t2s,241a 位点为对照，对比分析肿瘤组织基因组在相同多态位 在作用方式上 RB基因与起显性作用的癌基因有着 点的杂合性有无改变。如果肿瘤组织 DNA序列本身 明显的区别，即在两个正常RB等位基因全部丢失或 发生变化，缺失了某一等位片段，则该位点将由杂合状 失活时，肿瘤才会发生。基于这种隐性作用方式，又被 态变成半合状态。这样就能够分析出与该标记 DNA 称为隐性癌基因 R（ecessiveOncogene)。由于这类 位点紧密相联的目的基因有无等位基因缺失或变为纯 基因是通过染色体缺失而被发现的，而携带这种缺失 合子。所以只有标记 DNA多态位点为杂合子的个体 的个体极易发生这种肿瘤，由此也称这种基因为肿瘤 才能提供有用的信息。 易感基因 (CancerSusceptibilityGene)。在RB的研 RB基因根据染色休检查和遗传连锁分析资料定 究中，人们首次获得了一个特定隐性癌基因的丢失或 位在染色体13g14区段[a,xal,Cavenee选择了7个与 失活与人类肿瘤发生之间有关的直接证据，开拓了人 RB基因紧密连锁的DNA片段做探针，检测了RB病 们认识癌变的眼界，开始关注特异基因的丢失或失活 人瘤组织和正常体细胞的RFLP,杂交结果表明，在 在癌变中所起的作用。研究类似过程是否也发生在其 RB基因位点上，正常体细胞呈杂合状态的个体，在肿 它肿瘤中，采取什么策略能够检测出肿瘤组织的基因 瘤组织中却出现了半合和纯合的显著改变。此外，又 丢失，以及这些基因丢失在肿瘤的发生和发展中可能 检查对照了其它染色体的8个