细胞房使用流程及细胞培养注意事项流程.doc

细胞房使用流程及细胞培养注意事项流程 需使用细胞房的人员请提前一周至负责人处登记。 进入细胞房前，先换专用鞋 进入缓冲间，穿衣、戴帽和口罩 进入层流室，戴手套、消毒后，才可进行实验 每天工作完成时，最后一个同学需负责关掉风机、空调及细胞房门 注意事项 加强自身实验素养，具备在对自己负责的同时必须对他人负责的思想。 每天使用细胞房之前，必须将缓冲间及层流室用紫外灯照射30 分钟。 消毒结束后，通风15分钟后才可使用。 细胞房的拖鞋仅能在细胞房内使用，不得穿出。 进入层流室必须换衣服，戴帽、口罩及手套。 不得将外来人员带入。 保持细胞房内外地面、桌面的清洁、整齐，不得有杂物及废弃物。 关于培养箱 打开培养箱之前，必须将手套上喷上消毒剂。 拿细胞时动作要迅速，并随手将培养箱门关上。禁止培养箱不关，避免反复开关。 记住放置细胞的位置，不经他人允许，不得动别人的细胞。 每个人都有义务和责任经常观察CO2 钢瓶中气体的使用情况。 关于离心机 离心细胞必须打开制冷开关。 离心时，离心管必须平衡。 离心结束时，依次关制冷开关、总开关、拔电源。 关于显微镜 保持载物台的清洁。 载物台上的所有附件用后，全部放回载物台。 用后，一定记住关电源。 关于超净工作台 掌握正确地开门方式。 实验前，必须点燃酒精灯，并用酒精棉将台面消毒。 实验过程中，手臂不能与台面接触。 取用超净工作台的所有物品，必须注意避免双手与装有内容物的无菌区域接触。 枪头盒放置的位置必须与枪架有一定的距离。 所有经高压消毒、烘干过的物品在放入超净工作台后，需照射30分钟后才能使用。 实验结束后，托盘内所有废弃物必须全部移走，固体物可倒入垃圾桶、液体必须倒入细胞房外的水槽，并冲洗。 实验结束后，必须用酒精棉将台面消毒。 紫外灯照射。 关于水浴箱 用前，先检查箱内是否有水，并将小容器内的水换上新的超纯水。 温度为39 度，预热2 小时。 用完后，关开关及电源。 关于细胞房的清洁 每周必须做一次清洁。 清洁工作必须在当天所有的实验结束后进行，不得在别人实验时进行。 培养箱内托盘清洗，加超纯水。 培养箱内用消毒水擦拭，之前将所有的细胞瓶盖旋紧，移动细胞瓶时一定要当心。 整理桌面、用专用抹布将桌面擦干净。 用专用拖把依次将层流室、缓冲间及外面过道各擦2次。 倒垃圾。 紫外灯照射30分钟。 关于培养液及胰酶 配制人员必须严格按配方，配制时必须严格无菌操作，确保培养液及胰酶无菌。 小牛血清必须54度灭活30分钟，期间要不时地晃动。 培养液及胰酶要求每人各有一份，不得与他人混用。 每次使用前，培养液及胰酶要提前预热。 每次使用后，瓶口火焰消毒后，必须用封口膜封口。 如有污染，可经过滤后使用。 我已经阅读并理解上述规定，能够做到在使用细胞房期间严格遵守。 签字： 日期 2