微生物的培养和应用课件.ppt

下表关于四种生物的能源、碳源、氮源、新陈代谢的类型，描述正确的是 四：营养基配制的原则 1：目的要明确 配制培养基要根据 培养的微生物、培养的目的、培养基的用途来确定培养基的化学成分、物理状态。 2：营养要协调 3：PH要适宜 常用的灭菌方法 常用的消毒方法 平板划线分离微生物的原理：连续划线。由于划线后，线条末端的细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能 得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 注意事项：第一步以及每一次划线之前和划线结束后都要灼烧接种环。灼烧接种环要冷却后再划线。每次划线之间灼烧接种环的目的是杀死上一次划线残留的菌种，使下一次划线的菌种直接来至于上一次划线的末端，使每一次划线的菌种数目减少。 稀释涂布平板法分离微生物的原理：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂平板表面，经过培养，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将分散成单个细胞，在培养皿表面形成单个菌落。 培养基灭菌后，需要冷却到50度左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 刚刚不烫手。 为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 防止瓶口附近的微生物污染培养基 平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 使培养基表面的水更好的挥发，防止皿盖上水珠落入培养基 在倒平板的过程中，不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 空气中的微生物会在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，最好不要用该培养基培养微生物。 六、无菌操作 1、获得纯净培养物的关键： 2、无菌操作 避免杂菌感染操作对象的操作过程 3、哪些地方有菌可能导致菌体感染？ 操作者 培养基、接种工具、器皿 空间 防止外来杂菌的入侵 4、灭菌和消毒 消毒：温和的因素杀死一部分对人体有害的微生物。 举例：煮沸，70%酒精溶液 问题：一段时间后为什么会腐败？ 不包括芽孢和孢子 灭菌：强烈的因素杀死所有微生物，包括芽孢和孢子。 思考：哪些因素可以灭菌、消毒？ 物理——高温、紫外线 化学——酒精、氯气、石碳酸 种类 主要方法 应用范围 灼烧灭菌 酒精灯火焰灼烧 接种针、接种环或其他金属用具，接种过程中的试管口、三角瓶口 干热灭菌法 电热鼓风干燥箱160～170℃加热1～2h 培养皿、试管、移液管等玻璃制品和金属制品不适宜用其他方法灭菌而又耐高温的物品 高压蒸汽灭菌 压力100Kp、121℃维持15～ 30分钟 培养基及多种器材、物品 种类 主要方法 应用范围 巴氏消毒法 60～85℃下处理30～35分钟、 牛奶、啤酒、果汁等不宜高温灭菌的液体 煮沸消毒法 100℃沸水浴 日常食品、灌装食品 紫外线消毒法 30W紫外线灯照射30分钟 接种室空气 化学药物消毒法 体积分数70%～75%的酒精、碘酒、来苏水等 皮肤、伤口、动植物组织表面的消毒 思考：以下应当用何种方法灭菌、消毒？ 操作者 培养基 接种工具 器皿 空间 牛奶 ——手用酒精消毒 ——高压蒸汽灭菌 ——灼烧 ——干热灭菌 ——紫外线 ——巴氏消毒 70～75度30min 80度15min 灼烧灭菌 微生物的接种工具 (接种环、接种针、试管口)或其他金属用具直接在火焰的充分燃烧层灼烧 干热灭菌 160－170℃ ；1－2h 能耐高温的需要保持干燥的物品( 玻璃器皿) 高压蒸汽灭菌 100kPa 121℃ 15-30min 通常用于培养基的灭菌 总结：无菌技术 1、实验操作空间、操作者、衣着和手要 和 。 2、将用于微生物培养的器皿、接种工具和培养基等进行 。 3、为了避免周围环境中微生物污染，实验操作应在 附近进行。 4、实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。 清洁 灭菌 酒精灯 消毒 七、接种技术 无菌条件下将微生物接入培养基的操作过程称为接种。 1、接种工具 2 、常用的接种方法 斜面划线法 做什么准备？ 点燃酒精灯 斜面向上 斜面划线接种的操作过程 斜面用什么接种？ 接种环如何灭菌？ 取棉塞（不放到桌面？） 试管口灭菌 挑取少量菌体 从里到外轻轻划“S”型曲线，不要划破培养基 试管口通过火焰，塞紧试管口 放在37度恒温箱中培养24h 稀释