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蛋白表达概述.ppt
蛋白表达概述;常用蛋白表达系统(host) ;大肠杆菌表达系统 ;酵母表达系统 ;昆虫细胞表达系统 ;哺乳动物细胞表达系统 ;各种表达系统各有其优缺点，大肠杆菌和酵母表达系统蛋白表达水平高，生产成本低，但它们的加工修饰体系与昆虫细胞、哺乳动物细胞不完全相同；哺乳动物细胞产生的蛋白质更接近于天然蛋白质，但其表达量低、操作繁琐。
各种表达系统由于翻译后的加工不完全相同，因而产生的重组蛋白的生物学活性和免疫原性有时会有差别。因此，选择表达系统时，必须充分考虑各种因素，如所需要表达的蛋白是否有毒性，是否有活性，是否需要糖基化，还需要考虑成本、产量及纯化路线和安全性。
对于我们来说，最常用和最需掌握的是大肠杆菌表达系统;Factors in E.coli protein expression;表达载体(Vector) ;pET载体E.coli表达蛋白流程; pET system; 选择合适的载体; 目的???白的应用; 目的蛋白的已知特性; 克隆策略; 蛋白溶解性和细胞定位 ; 非融合表达，融合表达，分泌表达 ;pET载体的融合标签; E.coli宿主菌; 用于克隆的宿主菌; 用于表达的宿主菌; 表达条件; 培养基; 抗生素和诱导剂; 表达条件优化; 增加可溶性和折叠; 稀有密码子; 毒性基因及质粒稳定性; 例1:载体对表达的影响; 例2:宿主菌对表达的影响; 例3:表达条件对表达的影响; 总结
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