千里光对大肠埃希菌R质粒消除作用的血清药理学的研究.pdfVIP

·1238· 千里光对大肠埃希菌R质粒消除作用的 血清药理学研究术 张文平 曹镐禄张文书 曾雪英 赣南医学院病原生物学教研室(江西赣州：)41000) 【摘要】 目的应用中药血清药理学方法，研究千里光对大肠埃希茵R质粒的消除作用。方法 以千里光 水浸液灌胃小鼠获得的合药血清作为消除剂，以临床分离的多重耐药大肠埃希茵作为靶细茵，进行体外R质粒消 除试验，同时设千里光水浸液、十二烷基硫酸钠(SDS)和空白对照组。结果舍千里光血清体外作用大肠埃希茵 48h后，R质粒的消除率为2．8％，而千里光水浸液、SDS和空白对照的消除率分别为2．2％，14．9％。0．1％。结论 中药千里光对大肠埃希茵R质粒具有消除作用，且含药血清消除作用强于水浸液。 【关键词】 千里光大肠埃希茵R质粒消除血清药理学 大肠埃希菌是医院内获得性感染的主要致病菌， toryconcentration，MIC)o 其常携带耐药性质粒(R质粒)，在抗生素选择性压力 1．3．3含千里光血清亚抑茵浓度的测定含千里光 下在肠道细菌间进行传递，使耐药性菌株越来越多，给 血清用LB肉汤培养基倍比稀释，各稀释管加试验菌液 X 临床治疗增加了困难。用人工方法使R质粒从宿主茵 (浓度1．5109cfu／nd)5 p,l，每管LB培养基总量为 中消除，使其恢复对抗生素的敏感性，是临床治疗多重 1 ml，37℃培养48h，观察细菌生长现象。以肉眼观察 耐药菌感染的新思路¨1。目前，有关R质粒消除的研 无细菌生长的下一试管浓度为药物的亚抑菌浓度。 究国外内有较多报道胆】，但均未见用中药血清药理学 1，3．4质粒消除试验H1从亚抑菌浓度管中取50心 方法进行研究。本研究以含千里光血清作为消除剂， 菌液分别划线接种于10块4％琼脂平板培养基上，370C 对临床分离的多重耐药大肠埃希菌进行了体外R质粒 培养24h，待长出单个菌落后，挑取单个菌落1000个， 消除实验，现报告如下。 l材料与方法 (40¨g／m1)或AP(20v-g／m1)的药物平板上以及不含 药物的4％营养琼脂平板培养基上，370C培养24h，观 1．1 茵株大肠埃希菌(E．coil)，从赣南医学院第一 察并记录结果。 附属医院尿路感染患者尿中分离并鉴定为大肠埃希 1．3．5 消除子筛选及鉴定挑取在无药平板上生长 菌，对四环素(TC)、氨苄青霉素(AP)、链霉素(SM)均 耐药。 而在含药物平板不长的菌落，即初步确定为R质粒消 除子，再经相同抗菌药物平板复试以后，最后确定为R 1．2 药品与试剂 千里光购于江西赣南医学院第一 质粒消除子，并计算出消除率(消除率=含药物平板不 附属医院中药房；营养琼脂为上海医学化验所产品； LB肉汤培养基(每Illl中含蛋白胨l 长的菌落数／无药平板上生长的菌落数)。将搜集到的 g、酵母抽提物 5 g、氯化钠5g、葡萄糖1g，pH7．2)；十二烷基硫酸钠 消除子与原菌液同时按文献M1快速抽提质粒DNA， 0．7％琼脂糖凝胶电泳，以检测质粒带的消失情况。 (SDS)购于华美生物工程公司；四环素(TC)、氨苄青 1．3．6对照实验选用千里光水浸液和传统消除剂 霉素(AP)、链霉素(SM)均系国产标准品。 1．3 方法 SDS及以不经任何消除剂处理作为空白对照实验，其