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氮源浓度对L-缬氨酸发酵的影响
冯宁 白亚磊 徐庆阳 谢希贤
摘要：文中以黄色短杆菌XV0505为供试菌株，研究了不同氮源对L-缬氨酸发酵的影响，选
定了以豆饼水解液和硫酸铵为最佳氮源，并以硫酸铵为添加氮源研究了不同初始NH4+浓度对
发酵过程和菌体内代谢流量的影响。研究表明，氮源浓度过高或不足都会降低L-缬氨酸的
产量，在不补加氮源的基础上确定了合适的氮源添加量浓度225(nm)ol/L。在最优的氮源浓度
下，在5L发酵罐发酵60h，发酵液中L-缬氨酸可达57.78g/L。
关键词：L-缬氨酸；氮源浓度；代谢流;分批补料发酵
0．06，Leu0．2，Met
0．4，MnS04·H200．01，Ile 0．5，VBl
20099，生物素100“g，
pH7．0’7．2，0．1Mpa，20rain。
1．3培养方法
1．3．1菌种活化：取斜面保藏菌种划线接种于活化斜面，32℃恒温静置培养
24h。
1．3．2种子培养：接一环生长良好的活化斜面至装有30mL种子培养基的
期。
1．3．3摇瓶培养：按10％接种量将种子液4mL接入装有36mi发酵培养基的
件做3瓶，L一缬氨酸产量取平均值。
1．3．45L发酵罐培养：按15％接种量将种子液接入5L发酵罐中，总装液量
酵过程每隔4h测定菌体干重和L一缬氨酸产量。
1．4分析方法
1．4．1L-缬氨酸含量：应用高效液相分析系统测定。
cell
1．4．2菌体生物量：菌体生物量以菌体干重(DCW，Dry
weight)表示。
1．4．3葡萄糖及乳酸浓度：采用生物传感仪(SBA-40C)测定。
1．4．4溶氧及pH：电极在线测定。
1．4．5铵离子浓度：应用多参数生化分析仪(Nova300)测定。
2．结果与讨论
2．1NH4浓度对L一缬氨酸分批发酵的影响
无机氮源氮元素分子形式单一，均表现为铵根离子(NH。+)，本实验以NH4+的
物质的量(衄ol／L)来表示氮源的浓度，能定量分析不同氮源浓度对XV0505发
酵生产L一缬氨酸的影响，为进一步的氮源优化提供依据，从而提高L一缬氨酸的
产量。
然后考察不同NH。+浓度对XV0505合成L一缬氨酸的影响，结果见表3。
表1不同NH4+浓度下L一缬氨酸发酵结果的比较
Tablel ofL-valinedifferentadditiveamounts
Comparison byusing ofNH4+
Initial ResidualGlucose／acid
NH4’L-valine DCW
Productivity
丘IUCOSe 口IUooseconVertlnQmto
(mmol／L)(g∞
。(g／L) 。(圳 (％)。(s／L)(s／sDCW)
75 20．2 140 18 16．56 19．15 1．05
150 22 140 17 17．89 19．23 1．14
225 23．5 140 17 19．1l 19．28 1．22
300 22．4 140 19 18．5l 19．24 1．16
57
375 21 140
由表1
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