采用微生物法测定饲料中烟酸与烟酰胺有效含量探索.pdfVIP

技术篇 采用微生物法测定饲料中烟酸与烟酰胺有效含量的探索 董爽1马秋刚1贾如1刘延岩L2薛华伟2计成1 (1中国农业大学动物营养国家重点实验室，北京，100193； 2北京福乐维生物技术有限公司，北京，100071) 摘要：借鉴并改进了婴幼儿食品和乳品中烟酸及烟酰胺的微生物测定法，测定了10种天然饲料及8种全价 llus 饲料中烟酸的有效含量．植物乳杆菌(LactobaciPlantarum)ATCC8014对烟酸和烟酰胺的含量具有极高 的特异性与灵敏性，通过测定其在含有烟酸或烟酰胺的样品中形成的光密度来测定样品中烟酸有效含量。结果 烟酸及烟酰胺有效含量的测定重现性好、灵敏性高，为天然饲料和全价料中烟酸及烟酰胺的测定提供了参考． 关键词：微生物法：植物乳杆菌；烟酸；饲料 烟酸是属于B族维生素，又称尼克酸、维生素B5、 烟酸及烟酰胺具有极高的特异性与灵敏性，缺乏烟酸与烟 NA，是具有生物学活性的吡啶一3一羧酸及其衍生物的总称 酰胺时其生长受到抑制，故利用植物乳杆菌的这一特性可 (吴妙宗，2001)。烟酸在体内很容易转化成有活性的烟以测定样品中烟酸和烟酰胺的有效含量。微生物法的原理 酰胺。烟酰胺是辅酶I(烟酰胺腺膘呤二核苷酸，NAD)是当测定培养基中含有除烟酸及烟酰胺外的所有菌体生长 和辅酶ll(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸，NADP)的组成所需的营养物质，则在一定范围内植物乳杆菌的生长量就 成分，参与碳水化合物、脂肪、蛋白质等供能代谢反应中 与标准管中标准溶液的烟酸含量以及未知浓度的待测溶液 氢和电子的传递。由于烟酸具有预防和治疗癞皮病的作 中烟酸和烟酰胺的有效含量相对应。从而可定量计算出样 用，所以又称为抗癞皮病维生紊，简称维生素PP。烟酸 品中烟酸及烟酰胺的含量(袁硕，1999；殷晓红，2003； 的生理功能包括促进细胞新陈代谢，扩张血管，也有缓解 Ball。1998)。微生物法具有灵敏、准确性高等优点，并 末梢血管痉挛的作用(李钟玉，2003)。很多研究已经指且能够准确反映维生寨的有效含量(殷晓红，2003)。本 出，日粮中添加烟酸或烟酰胺对动物脂肪代谢(陈承祯， 文将婴幼儿乳粉中烟酸及烟酰胺含量测定的微生物法应用 于天然饲料及全价料烟酸及烟酰胺的测定．并对其精密度 2002)、生产性能(刘国华。1999；孙国君，2003；曾一 鸣，2005)、疾病预防、缓解应激、预防奶牛酮血症等方和准确度进行分析，旨在探讨微生物法能否用于饲料中烟酸 面都有积极的作用(桂东城，2008；耿艳红，2007)。及烟酰胺的测定，为饲料中烟酸及烟酰胺的测定提供参考。 目前常用的烟酸及烟酰胺测定方法主要有微生物法 1材料与仪器 和高效液相色谱法。高效液相色谱法具有快速简便的优点 (William．2000)．目前测定维生素预混料的国标方法即 为该法。但在全价料及天然饲料原料方面烟酸及烟酰胺的 1．1 菌种 测定仍然没有国标，这是因为全价料及天然饲料原料中烟 8014．美国农业部 植物乳杆菌(L．plantarum)ATCC 酸含量极低，采用测定预混料的高效液相色谱法测定时出 惠赠。 峰面积小或样品峰与杂峰粘连．误差很大。 1．2培养基 婴幼儿乳粉中烟酸及烟酰胺含量的测定常采用微生物 法。植物乳杆菌(Lactobaciltus 8014对 MRs肉汤培养基：葡萄糖309，胰蛋白胨log．牛肉膏 plantarum)ATCC 115 论文集 109，酵母浸粉59，柠檬酸铵29，醋酸钠59，磷酸氢二钾