基于石英晶体微天平自组装膜检测c-myc蛋白初探.pdfVIP

第十一届全国化学传感器学术会议湖南长沙2011年lO月22-25日 基于石英晶体微天平自组装膜检测c．myc蛋白的初探 周婷，张元元，田雁飞，姚玉强，何婧琳，曹忠幸 (长沙理工大学，化学与生物工程学院，电力与交通材料保护湖南省重点实验室，湖南长沙410004： ’Email：zhongca004@yahoo．com．cn) 自组装膜是功能活性分子通过化学键自发吸 附在异相界面上而形成的有序分子组装体系，它是 嵋，同时采用电化学循环伏安法对传感器膜组装过 自20世纪80年代以来快速发展起来的一个新型有程进行监测，从而制备成c．myc单克隆抗体修饰的 机成膜技术111。其形成是基于长链有机功能分子在 QCM传感器。将该QCM传感器与一定浓度的C．myc Si、Au等基底材料表面的强烈化学键合(如Si．O键、蛋白溶液接触，置于冰箱中反应6h，水洗、干燥后 Au．S键等)、以及有机分子链官能团(如．CH3， 在氮气氛围中测量频率变化值，发现对C．myc蛋白 10do ．COOH，．OH，-Nil2，．CH=CH2及．C=CH等)间的在8．6l×lOd2～1．13x mol／L之间，随着C．myc蛋 强相互作用，通过固．液界面间的化学吸附或化学反 白浓度的增加频率的变化量也增大，频率变化值与 应，在基片上形成化学键连接的、取向紧密排列的 浓度对数成线性关系，线性方程可拟合为 有序单层膜[21。入的C．myc原癌基因正常位于人染色 检测下限为8．61×10以2mol／L。该传感器用0．5molFL 体8q24，编码相关的C．myc蛋白。c．myc蛋白是最早 NaCI—O．Olmol／L 被发现与肿瘤细胞增殖活性相关的原癌基因产物 NaOH溶液处理10min，水洗后可 之一，其过度表达可改变细胞内的基因调控，使细 再生，表明该方法具有较好的应用前景。 胞易于转化为恶性表型，其他癌基因的活化或抑癌 基因的失活均可启动或加速肿瘤发生【3】。因此在线 关键词：自组装膜；石英晶体微天平；c-myc蛋白；癌基 检测c．myc的含量变化，对于癌症的预防和诊治有因 着不可或缺的重要意义【4棚。本文采用自组装膜技 参考文献： 术，将石英晶体微天平(QCM)晶振的金电极用 554． A．Chem．Rev．，1996，96，1533一l Piranha溶液洗净后，先后置于0．01mol／LL．半胱氨酸 【1】Ulman (L．cys)中避光反应2h、2．5％的戊二醛溶液(GS)【21杨生荣，任嗣利，等．高等学校化学学报，2001，22(3)， 中活化lh，水洗、干燥后滴加20I．tL 470476． 0．004．∥mL B，Land 【3】Amati c．myc单克隆抗体(C．ABl)于石英晶体电极表面， 置于冰箱中12h，水洗、干燥后在氮气氛围中测量 【4】SejersenT，SuEmegiJ，RingertzNJ．Cell．Physi01．， 频率变化值。L．半胱氨酸修饰前后的频率变化值为 1985，125，465-470．