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油 气 田 环 境 保 护 ENVIR()NMENTAI。PR()TECTI()N()FOILGASFIEI。DS 石油降解菌群构建的研究 张海玲杨琴赵敏 (中国石油长庆油田公司油气工艺研究院) 摘 要 时，对原油的降解效率最高为61．3％。 关键词 石油降解茵；菌群构建；正交实验；含油率；降解率 中图分类号：X172 文献标识码：A 文章编号：1005—3158(2013)03—0019-03 0 引 言 性剂产生菌D4。种子培养基：牛肉膏3g，NaNO。1 石油是一种复杂的混合物，不同品质的原油其组 1 g，(NH。)2SO。1g，Na2HPO。1．2g，KH2P04g， 成成分差别很大，石油烃类化合物组成成分的差异影 O0．01 2 0．002 MgSO。·7H2 g，CaCl g，调pH值为 响其生物降解率¨】，且每种微生物所利用的石油烃也 mL／250 7．2，分装100 mL三角锥瓶中，121℃湿热法 有差异，现已发现70个属、200多种微生物能够氧化 灭菌20min。石油培养基：原油2 g，硝酸铵0．3g，磷 降解一种或多种石油烃类。而菌群构建可以组合多 酸二氢钠0．1g，磷酸二氢钾0．1g，硫酸镁0．1g，氯 个单种微生物降解能力形成一个完善的降解系统，集 化钙0．005g，氯化铁0．003g，水100mL，pH值约为 合多种酶促活性，扩大底物范围，因此利用菌群的协 7，置于灭菌锅中，121℃灭菌20rain。培养条件：30℃ 同作用至关重要卫。。菌群生物强化的优势在于组成 摇床振荡培养，转速120r／min；恒温培养箱30。C培养。 菌群的优势菌种在生理功能和遗传信息上的互补性， 1．2组合方案 总体上更高效，更稳定、配置更合理、功能更完善的菌 群替代活性较低的单种和土著菌群，从而提高降解活 前期实验所获得的优良菌株中原油降解菌有 性，促进生物降解∞J。目前对菌群的研究还停留在初 步阶段，即将几种优势菌简单地混合，组建菌群的过 解菌有C3、YC3，石蜡降解菌有D4，表面活性剂产生 程毫无规律。这样构成的菌群很难发挥其最大作用， 菌D4。首先将不同功能的菌株组合，组合方案见表 有时甚至因为种间的抑制作用而产生负面效应[4j。 1，进行液态原油降解实验，选出降解效果好的一组， 研究的菌群构建正是要寻找一个行之有效的构建方 进行下一步实验。 式，首先将不同功能菌株组合进行降解实验来排除拮 1．3各菌株之间成比例的正交实验方案 抗效应，然后通过正交实验确定各菌株的添加比例来 将初步筛选得到的配伍方案进行正交分析，如表 优化其共生效应，使菌群构建变得有规律可寻，使菌