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寻找肿瘤蛋白标记物：低丰度蛋白 生物通报道：从上世纪 30 年代来，癌症的死亡率没有得到很大的改观。科学家们希望能通过从复 杂的生物样本中分离鉴定出敏感特异的肿瘤特有的标记，来帮助肿瘤诊断，评估预后，评估肿瘤的分期， 复发，药物靶位点等。 这就是肿瘤标记物，肿瘤标记物首先是通过利 他们的研究课题是比对吸烟的肺癌患者与不 用从肿瘤细胞中提取的单克隆抗体发现的。在获得 吸烟对照组之间的血清蛋白差异，在实验中，研究 抗血清后，通过免疫吸附去掉正常细胞，留下肿瘤 人员发现通过蛋白分离方法，尤其是为了更高的分 特异性的抗原，筛选并评估这些候选物成为了寻找 辩率，进行了多次分离之后，血清和血浆中一些低 新的肿瘤标记物的经典方法。但是这种方面费时又 丰度蛋白会丢失。而且蛋白分离过程也十分枯燥乏 耗力，因此寻找一个快速的评估大量潜在的肿瘤标 味，成本也不低，因此研究人员希望找出一种方便 记物方法十分必要。 快捷，能挖掘到低丰度血清蛋白的新方法。 最开始，科学家们利用的是基因表达谱方法， 研究人员经过比对验证，发现利用磁珠亲和纯 这种方法能同时分析成千上万个基因的表达水平， 化方法来分离蛋白，与密度梯度离心等方法相比， 但是基因学的最终目标是功能，这却是在蛋白质水 能提高分离的纯度，减少血清中其它物质的干扰， 平上来体现的，因此只有在蛋白质水平上利用生物 降低污染，而且更重要的是不会丢失低丰度血清蛋 样本可以找到有效的可作为疾病标记物的候选蛋 白。 白，特别是在利用临床的血和尿的样本时才更有意 这方面的产品目前市场上也不少，伊丽莎白临 义。 床肿瘤科的研究人员推荐了 Bio-Rad 公司的 然而蛋白又不能像 DNA那样扩增，而且蛋白种 ProteoMiner protein enrichment kit，和 GE 的 类繁多（包括许多同形异构体），因此要找出癌症 Mag Sepharose 磁珠。 病患和健康对照之间的明显分子差异并不一件容 其中 GE 的 Mag Sepharose 磁珠能通过在磁珠 易的事情，另外即使研究人员幸运的找到了肿瘤标 上固定的抗体或其它蛋白，在免疫沉淀或 记物候选因子，也还需要从更多病患中筛选和验证 pull-down 中捕获目标蛋白，系列产品包括几种形 最佳的标记物，这个过程也许需要一个漫长，经年 式的磁珠：TiO2 Mag Sepharose（从复杂样品中富 累月的积累。 集磷酸化肽段），Protein A 和 Protein G Mag 一些已有的经验也许能帮助我们更快的找到 Sepharose（亲和层析填料，通过免疫沉淀捕获目 肿瘤蛋白标记物，比如低丰度蛋白的问题，来自伊 标蛋白），以及 NHS Mag Sepharose（可共价偶联 丽莎白医院临床肿瘤科的研究人员就针对这一问 任何带自由胺基的蛋白，用于多种类型的 题提出了一种解决方案。 pull-down 实验）。 2010年2月25日第七十三期 第 24 页，共 37 页 下一页 返回 这些磁珠能够被磁性装置快速