一阶导数停流法测定还原型谷胱甘肽的方法的研究.pdfVIP

第27卷增刊 福州大学学报(自然科学版) V01．27 1111生!旦 !!!垡!!堕!竺堕!!型!垃!型!班婪!!!些!墨璺!!!12 ．一一一—坠I卫．-!!堕 一阶导数停流法测定还原型谷胱甘肽的方法研究 游文玮1，刘彦2，王尊本2 (1_第一军医大学基础部，广东广州510515；2．厦门大学化学系，福建厦门361005) 摘要：还原型谷胱甘肽(GSH)在新亚铜试剂存在下能被cu2+氧化而产生cu+络台物，该§辱台物在 454锄处有特征吸收．采用导数动力学分光光度法间接测定GSH．系统研究了导数动力学方法的 实验条件，并对流动注射装置进行改进，保证导数光谱峰高的准确测量．实验结果表明．加入导 数技术可基本消除因采样时间不准给流动注射方法带来的误差． 关谴词：导数光度法；催化动力学：分光光度法；停流法；还原型谷胱甘肽 率圈分类号：0657．3 文献标识码：A 谷胱甘肽(GSH)是人体中许多新陈代谢过程所必需的物质，它能非酶化还原过氧化物、 自由基等膜物质．通过谷胱甘肽转移酶的作用，谷胱甘肽能与非生命物质或亲电物质结合。 t 起解毒作用．在谷胱甘肽过氧化物酶的催化下，还原态的谷胱甘肽能清除血红细胞中的过氧 化氢．谷胱甘肽的测定方法很多，有滴定法、分光光度法、荧光光度法和酶催化法“1”等 本文采用导数动力学方法对GSH进行定量分析．结果表明，加入导数技术后方法的重现 。 性好，精密度高，线性范围宽．简单快速 j 呲 n 八八 ㈣ 二 O 八一一 一。 t／s 图1停流法动力学曲线 图2一阶导数光谱 l原理 导数分光光度法是利用反应速率随时问变化率与反应物或产物的浓度之间的定量关系， 通过测量与反应速率成比例关系的吸光度随时间的变化率(即导数峰的高度值^)，从而求 出待测物的含量图l表示本体系以停流法测得的动力学曲线，图2是由图1变换得到的一 收稿日期：1999珈5—31 作者简介：游文玮(196卜)，男，副教授． 二，．一 。 增刊 游文玮等：一阶导数停流法测定还原型谷胱甘肽的方法研究 ·243· 囊萝 dA／dg成比例关系，也就与待测物的含量具有比例关系，借此可以进行定量分析．本文利 用下列反应： Cu2++GSH=Ca+{GSSG 用新亚铜试剂与Cu+反应形成具有特定吸收波长的稳定络合物，测定该络合物，便能间接 求出谷胱甘肽的含量． 2实验部分 Du一7 1)主要仪器美国BeckmanHS型分光光度计；日本HM一20E型酸度计； Lz一1010型蠕动泵；Lz一1020型采样阀． 2)试剂1．00g／LGSH标准溶液：50．00mg 3 量瓶中定容，避光存放，当日现配．10mmol／L新亚铜试剂贮液：o．217 g新