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微生态制剂对鹌鹑小肠发育、肠道菌群及
血清中胆固醇质量浓度的影响
摘 要: 研究日粮中添加活性乳酸菌微生态中药发酵制剂-保禽肽对鹌鹑小肠发育, 肠道菌群及血清中胆固醇质量浓度的影响。选用1日龄鹌鹑180羽, 随机分成4组, 每组3 个重复, 每重复15羽。对照组饲喂基础日粮, 试验组在基础日粮中分别按比例0.1%、0.2%、0.3%添加活性乳酸菌发酵制剂-保禽肽。结果显示,保禽肽 对鹌鹑小肠发育影响不大(P0.05) , 随保禽肽添加量的增加, 小肠中大肠杆菌数显著降低(P0.05) ,乳酸菌数量显著增加(P0.05) 。日粮中添加0.2%和0.3%保禽肽可显著降低血清中胆固醇质量浓度(P0.05) 。由此得出, 饲料中添加保禽肽可减少鹌鹑肠道内大肠杆菌数量, 增加乳酸菌数量, 同时可降低血清胆固醇质量浓度。
关键词: 微生态、中药、益生素、发酵、保禽肽、乳酸菌、小肠发育、大肠杆菌、血清胆固醇。
保禽肽是利用现代生物技术和先进设备利用工业规模生产的活性乳酸菌对精选中药进行发酵,提高中药功效4-28倍,并且改变了其适口性差的缺点。活性乳酸菌发酵制剂-保禽肽具有功效全面、见效快(24小时)、贮藏时间长、使用方便等优点 。活性乳酸菌是国际公认的可以饲用的有益菌种, 也是中国批准使用的有益菌品种, 是一种绿色环保无公害添加剂。目前, 有关研究报道主要集中于猪、肉鸡、反刍动物方面,对于鹌鹑的作用尚未见报道。本试验通过在日粮中添加活性乳酸菌发酵制剂来研究活性乳酸菌对鹌鹑小肠发育、肠道菌群及血清胆固醇质量浓度的影响。
1 材料与方法
1. 1 试验材料
饲用活性乳酸菌发酵制剂-保禽肽( 活菌数≥10 亿/g ) 由哈尔滨中科生物工程有限公司生产。基础日粮不含任何添加剂、聚糖类、益生素及抗生素, 分为0-2周龄和3-5 周龄2 个阶段, 基础日粮配方及营养成分见表1。
1. 2 试验动物的选择与分组
将180 羽1 日龄雏鹌鹑随机分成4 组, 每组3 个重复, 每重复15 羽。对照组饲喂基础日粮。试验组分别在基础日粮中添加0.1%、0.2%、0.3% 的保禽肽。
表1 基础日粮配方及营养水平
饲料原料/ ( g/ kg) 0-2 周龄 3-5 周龄 玉米 540 510 豆粕 270 260 进口鱼粉 100 90 米糠 50 100 骨粉 15 15 多维 2.5 2.5 微量元素 2.5 2.5 赖氨酸( 99%) 6 6 蛋氨酸( 99%) 1 1 食盐 1 1 石粉 12 12 合计 1000 1000 粗蛋白CP 243.8 229.4 总磷 P 4.0 4.0 总钙Ca 13.3 12.3 粗纤维 34.3 25.3 赖氨酸 11.2 8.7 蛋氨酸 4.7 3.8 注: 代谢能分别为12. 05 和11. 98 kJ/g。赖氨酸、蛋氨酸为计算值, 其余为实测值。基础日粮中微量元素添加为Mn 90 mg/kg、Zn 100mg/kg、Cu 7mg/ kg 、I0.3 mg/kg 、Fe 80 mg/kg.
1. 3 饲养管理
7 d育雏期在育雏箱中饲养, 7 d后采用笼饲养, 试验期35 d。自由采食和饮水, 消毒程序按常规方法进行。自然光和日光灯结合, 试验初期全天24 h 光照, 10 d 后逐渐减少日光灯光照时间,直至完全停止, 保持室内温度在33℃以上, 7 d后逐渐降低温度至室温。
1. 4 样品采集与制备
1. 4. 1 血清采集 35 d 时从每个重复中随机抽取已停止饲喂12 h以上的空腹鹌鹑4 羽, 称量活体质量, 用于计算肠指数。然后采用断颈放血进行采血, 分别装入离心管中, 3000 r/ min 离心10 min, 分离血清, 置-20℃冰箱中保存。
1. 4. 2 肠样采集 将35 d屠宰后的鹌鹑每个重复随机取4 羽, 总计48 羽进行解剖, 取其肠, 测量其空肠、回肠、十二指肠长度(mm) , 并计算肠指数。结扎盲肠口, 装入样品袋, 立即进行微生物培养计数。肠指数= 肠长度/体质量。
1. 5 指标测定
1. 5. 1 微生物 麦康凯培养基、乳酸杆菌选择性培养基购于北京奥博星生物技术有限责任公司,用常规检测法进行测定。采用麦康凯培养基37℃有氧培养24 h 进行大肠杆菌菌落计数; 采用乳酸杆菌选择性培养基37℃厌氧培养48 h进行乳酸杆菌菌落计数。根据菌落形态、颜色和革兰氏染色镜检结果进行鉴别, 用每克肠道内容物中细菌个数的常用对数来表示。
1. 5. 2 血清胆固醇 取洁净干燥试管5支, 编号, 依次加入标准胆固醇应用液0、0.1、0.2、0.3、0.4 mL,
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