:(酶工程)酶分子修饰.pptVIP

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  • 2016-09-14 发布于安徽
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4.修饰酶在体内的半衰期 5.最适pH 6.Km的变化 1. 化学修饰反应的类型 1) 烷基化反应 试剂特点:烷基上带活泼卤素,导致酶分子的亲核基团(如-NH2,-SH等)发生烷基化。 可作用基团: 氨基(Lys,Arg),巯基(Cys),羧基(Asp、Glu),甲硫基(Met),咪唑基(His)。 修饰剂:2,4-二硝基氟苯、碘乙酸、碘乙酰胺等。 烷基化反应 2) 酰基化反应 试剂特点: 含有 结构,作用于侧链基团上的亲核基团,使之酰基化。 可作用基团: 氨基,巯基,醇羟基(Ser、Thr),酚羟基(Tyr) 酰基化反应 3) 氧化和还原反应 试剂特点:具有氧化性或还原性。 氧化剂:H2O2 ,N-溴代琥珀酰亚胺 还原剂:巯基乙醇、DTT(二硫苏糖醇)等。 可被氧化的侧链基团:巯基,甲硫基,吲哚基(Trp)、咪唑基,酚基等。 可被还原的侧链基团:二硫键。 二、酶分子内部修饰 (一)蛋白主链修饰(肽链有限水解修饰) 利用酶分子主链的切断和连接,使酶分子的化学结构及其空间结构发生某些改变,从而改变酶的特性和功能的方法。 酶蛋白主链修饰通常采用酶法(用专一性较强的蛋白酶或肽酶为修饰剂)。 酶蛋白的肽链被水解后,可能出现以下三种情况中的一种: 引起酶活性中心的破坏,酶失去催化功能。 仍维持活性中心的完

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