高效液相色谱法测定植物组织中的细胞分裂素.pdfVIP

第十届全国有机分析学术研讨会 高效液相色谱法测定植物组织中的细胞分裂素 付蕾 王明林朱风岗 王建华 李长城 (山东农业大学，泰安 27lOl8) 关键词高效液相色谱玉米素二氢玉米素 摘要本文利用高效液相色谱法测定了植物组织中玉米素和二氢玉米素的含量，结果表明， 样品的前处理方法及液相色谱条件均能满足内源激素测定的要求。玉米素和二氢玉米素的驯收率 为74．78％和77．5蹋。变异系数为5．52和3．20。 细胞分裂素(CTK)是植物体内重要的一类内源激素，对植物的生长发育具有重要的调控 含量，结果表明样品的前处理方法及液相色谱条件均能满足植物组织中内源激素测定的要 求。 1样品处理 称取4．OOg植物样品，加80％冷甲醇40ml，少许抗氧化剂，研磨均浆，4℃过夜，抽滤， 3．5 8．0，用水饱和正丁醇萃取三次，合并正丁醇相，减压浓缩至于，用pH 有机相。水相调pH 8．0，过C培预柱， HAc—NaAc缓冲液洗出，加聚乙烯毗咯烷酮振荡半小时，抽滤，水相调pH 8096甲醇洗脱，收集洗脱液，40℃浓缩至干，lml优质甲醇定容。作HPLC分析用。 2色谱条件 流动相：Me伽：H舻75：25(v／v，pH=3．5)， 流速：0．8ml／min，检测波长：268nm， sorb SpheriC．。色谱柱。将植物组织提取液在 肝LC上进行分离和鉴定，结果见图1。由图可 知，标样和提取液具有相同的保留时间。两者 混合进样时，峰高相应增大，可确定植物组织 中含有玉米素和二氢玉米素。 3线性关系 准确配制不同浓度的标准溶液，用外标峰 面积法测定标准曲线，回归方程和相关系数分 分(rain)) 别为 围1标样和擅物攫取液的矗效液榴色谱圈 l—Z H)Z Z： A--O．018+0．428C．r=O．9989： 2一(Oi A=O．0070+0．396C．r=O．9982 (Dill)Z： (DiH)Z的最小检出限为1．40ng、2．96ng。 B133 第十届伞国有机分析学术研讨会 4方法回收率 jlJ 5．25：(DiH)Z为77．58±2．52％，CV为3．20，均符合微量分析的要求。 参考文献 l 张一二隆园艺学报1991)．17(4) 2 吴耕西 山东农业大学学报 t996．27．(3) inPlant Perfm。mance Determinationof Tissue by Cytokinins High Liquid Chromatography 砌Lei Zhu JianhuaLi WangMinglinFenggangWang C,hangcheng‘