合成鱼腥草素对鸡淋巴细胞增殖作用的研究.pdfVIP

中国畜牧兽医学会中兽医学分会2011年学术年会论文集 公司；SW-CJ．1F型超净工作台，苏州集团苏州安泰空气技术有限公司；EBA．8S型小型离心机，德国 Hettich公司。 1．2试验方法 1．2．1脾脏淋巴细胞悬液的制备 取21日龄健康鸡，颈动脉放血致死，无菌取出脾脏，去膜、清洗、剪碎，置于200目细胞筛上用 注射器内芯轻轻挤压，使其通过细胞筛，用适量的Hank’S液稀释后，取5mL细胞悬液沿管壁加到等体 积淋巴细胞分离液的离心管中，以2000r／min离心15min，吸取中间云雾状的淋巴细胞层于另一离心管 中，加入无Ca2+、M92+Hank’S液，1500 液调整细胞浓度为1X107／mL[4】。 1．2．2外周血淋巴细胞悬液的制备 取21日龄健康鸡，无菌采集抗凝血5mL，沿管壁缓慢加入到等体积加于淋巴细胞分离液之上，2000 胎牛血清的完全RPMl．1640培养液重悬，经台盼蓝染色计算活细胞数95％，用培养液调整细胞浓度为 1x】07／mLt5]。 1．2．3淋巴细胞增殖活性的测定(M下r法) 将上述得到的脾脏淋巴细胞悬液(外周血淋巴细胞)悬液加入96孔细胞培养板内，每孔100¨L， 验组共设置4个重复孔，并设立不同的对照(表1)。加样混匀后，将细胞培养板放入5％C02、37℃培