AGM区来源的基质细胞促进造血干细胞扩增的体外实验研究.pdfVIP

维普资讯 理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiolo~ 2007,23(7)：1373-1377 · 1373 · [文章编号] 1000-4718(2007)07—1373—05 AGM 区来源的基质细胞促进造血 干细胞扩增的体外实验研究 付劲蓉 ， 刘文励 ， 周玉峰 ， 陈惠芹 ， 周敦华 ， 黄绍良 (华中科技大学同济医学院附属同济医院血液科，湖北 武汉430030)； 中山大学附属第二医院干细胞中心，广东 广州510120) [摘 要] 目的：探讨主动脉 一性腺 一中肾(aorta—gonad—mesonephros，AGM)来源的基质细胞对造血干细 胞(HSC)增殖的促进作用，为探寻 HSC的体外扩增方法奠定实验基础。方法：分别从孕 11dBALB／c小 鼠胚胎 AGM区及6周龄小鼠骨髓分离、培养基质细胞，流式细胞仪等对基质细胞进行鉴定；利用小鼠胚胎干细胞(ESC)向 造血细胞定向分化的模型，结合高增殖潜能集落 (HPP—CFC)、原始细胞集落 (BL—CFC)形成实验及流式细胞仪分 析CD34 、CD34 Sca一1细胞比例，对比研究AGM及骨髓基质细胞对ESC来源的HSC的扩增作用。结果：小鼠 AGM和骨髓基质细胞在形态及表型上基本相似，均符合基质细胞的特征。AGM和骨髓基质细胞均可促进 ESC来 源的HPP—CFC的形成，但 AGM基质细胞还可促进 ESC来源的 BL—CFC的形成 ；流式细胞仪检测发现 ：在骨髓基 质细胞支持下 ，CD34细胞增加了3—4倍 ，但 CD34 ／Sca一1却无明显增加；而在 AGM基质细胞支持下CD34 、 CD34 Sca一1细胞均明显增加了4—5倍。结论：AGM基质细胞在有效扩增小鼠HSC同时 ，能很好地维持HSC自 我更新及多向分化的潜能。 [关键词] 主动脉 一性腺 一中肾；造血干细胞 ；基质细胞 [中图分类号] R363 [文献标识码] A Supportiveandexpansiveeffectsofaorta—gonad—mesonephros(AGM) - - derivedstromalcellson hematopoieticstem invitro FU Jin—rong ，UUWen—li，ZHOUYu—feng ，CHENHui—qin ，ZHOUDun—hua ， HUANG Shao—liang (DepartmentofHematology，TongfiHospital，TongjiMedicalCollege，HnazhongUniversityofScienceandTechnology， Wuhan430030，China；StemCellResearchCenter，TheSecond AffiliatedHospital，SunYet—senUniversity，Guangzhou 510120，hCina．E—mail：jrfu@咖．咖H．edu．cn) [ABSTRACT] AIM ：Toexplorethesupportiveandexpansiveeffectsofaorta—gonad—mesonephros(AGM)re一 onderivedstromalcellsonhematopoieticstemcells(HSC)invitro．METHODS：Themurinestromalcellsweresepara— tedandculturedfromAGMregionofa11daypostcoitum (dpc)mouseembryoand6weekmouse．Afteridentificationby Wright’sstainingandflowcytometry，thestromalcellswere