CD147和PCNA蛋白在人肺癌组织中的表达意义.pdfVIP

· 1450· 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 20 (!)； 二!墼 [文章编号] 1000—4718(2010)07—1450—03 · 实验技术 · CD147和 PCNA蛋白在人肺癌组织中的表达意义水 陈福春 ， 潘 琦 ， 张玉霞 ， 陈道平 ， 陈洪雷 (温岭市中医院胸外科 ，浙江 温岭317500；武汉大学基础医学院病理学与病理生理学系，湖北 武汉430071) [摘 要] 目的：本研究利用新型半导体免疫荧光标记试剂一量子点(QDs)结合组织芯片技术检测CD147 和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白在人肺癌组织中的表达，并与免疫酶法对比，探讨量子点免疫荧光组织化学技术的 有效性和实用性。方法：利用 QDs免疫荧光组织化学(QDs—IHC)技术分别检测人肺癌组织芯片中CD147和Pc— NA的蛋白表达，同时检测了CD147与PCNA的共表达，并与传统免疫酶法的结果对比。结果：QDs—IHC和传统 IHC检测结果显示：CD147和 PCNA蛋白表达在对照组和肺癌组之间相比，差异均显著(P0．05)。CD147和 Pc— NA蛋白表达之间呈显著正相关(r=0．533，P0．01)。QDs—IHC检测2种蛋白表达的阳性率均高于IHC所检测 的结果 ，但差异无显著(P0．05)。结论：QDs—IHC和传统IHC均能检测到CD147和 PCNA蛋白在肺癌组织中的 表达，但QDs—IHC的灵敏性稍高于IHC，背景更干净。CD147与PCNA协同促进肺癌的恶性进展。 [关键词] 肺肿瘤；CD147；量子点免疫荧光组织化学；增殖细胞核抗原 [KEYWORDS] Lungneoplasms；CD147；Quantumdotsimmunofluorescencehistochemistry；Proliferatingcell nuclearantigen [中图分类号】 R734．2 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2010．07．044 量子点(qunatumdots，QDs)是一种由Ⅱ一Ⅵ族或Ⅲ一V 鼠生物素化 Ⅱ抗 (工作浓度均为 1：200)；通用型sP试剂盒均 族元素组成的，直径约为2—6nm，能够接受激光激发产生荧 购 自北京中杉金桥生物技术有限公司。量子点超敏荧光试 光的半导体纳米颗粒 ，特殊的结构使其具有独特的光学性质 剂盒[QDs(605nm)一conjugatedstreptavidin，QDs—sA]和 如其激发光谱宽且连续分布，而发射光谱窄且呈对称分布， 量子点双染荧光试剂盒 [QDs(605nm)一SA+QDs(545nm) 而且可通过改变量子点内核的尺寸对其发射光波长进行精 一 conjugatedgoatnati—rabbit—IgG，QDs(545am)一IgG]均 细调节等。这些特性使其成为生物医学标记和光学成像的 购自武汉珈源量子点技术开发有限责任公司。 强有力工具 j。癌细胞的侵润转移是促进癌恶性进展的重 2 方法 要因素 J，而细胞外基质金属蛋白酶诱导因子 (extracellular 2．1 QDs—IHC检测 CD147和PCNA蛋 白表达 实验方法 matrixmetalloproteinaseinducer，CD147／EMMPRIN)是个多功 参照文献 』，组织芯片滴加90％甘油封片后，上荧光显微镜 能蛋白，可诱导基质金属蛋白酶的产生而促进肿瘤细胞的侵 蓝光激发 QD605，以细胞内出现红色的荧光颗粒为阳性。用 润和转移 J。本研究采用量子点免疫荧光组织化学(QDs— TBS代替 I抗作阴性对照，以已知阳性片作阳性对照。镜下 histochemistry，QDs—IHC)结合组织芯片 观察显示 CD147蛋白定位于细胞膜和胞质内，而PCNA则定 技术检测CD147和增殖细胞核抗原 (proliferatingcellnuclear 位于胞核内。高倍镜下每例组织选4个视野，每个视野计数 natigen，PCNA)蛋白在肺癌组织中表达，并与免疫酶法对比， 100个细胞 ，按阳性细胞所 占百分比判断