IL-24基因重组腺病毒载体转染的树突状细胞促进宫颈癌CaSki细胞凋亡.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2014，3O(1)：4147 · 41 · 【文章编号] 1000-4718(2014}01—0047—07 ／L24基因重组腺病毒载体转染的树突状细胞 促进宫颈癌 CaSki细胞凋亡术 潘巍巍 ， 曹利仙 ， 徐 营 ， 沈忠飞 ， 易发平 ， 宋方洲 (’嘉兴学院医学院生物教研室，浙江嘉兴314001；重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室，重庆400016) [摘 要] 目的：探讨白细胞介素24(interleukin-24，／L一24)基因重组腺病毒载体转染的树突状细胞(dendri- ticcells，DCs)是否在体外诱导细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxicT—lymphocytes，CTLs)对宫颈癌 CaSki细胞的杀伤效 应。方法：分离培养小鼠未成熟 DCs，将已成功构建的带有IL-24基因的重组腺病毒感染体外培养的小鼠未成熟 DCs，提取 CaSki细胞裂解物负载DCs，制备DC疫苗，Westernblotting检测IL-24蛋白的表达；PE—AnnexinV和West- ernblotting检测细胞凋亡及cleavedcaspase-3表达；克隆形成实验检测克隆形成能力；裸鼠荷瘤模型体 内研究带有 儿-24基因的重组腺病毒载体转染DCs在体外诱导的CTLs对宫颈癌CaSki细胞的杀伤效应。结果 ：Westernblot- ting检测 IL-24蛋 白高表达；DCs疫苗诱导产生的CTLs后与CaSki细胞共培养，对 CaSki细胞生长具有明显的抑制 作用，DCs疫苗诱导产生的CTLs促进CaSki细胞凋亡，增加 cleavedcaspased-3蛋白表达，克隆形成实验检测该疫 苗具有抑制CaSki细胞形成克隆的能力。裸鼠的成瘤实验表 明，带有 IL-24基因的重组腺病毒载体转染DCs可以 抑制体内肿瘤的形成，促进肿瘤细胞凋亡。结论：儿- 基因重组腺病毒感染DCs制备的DCs疫苗可诱导CTLs，从 而抑制宫颈癌CaSki细胞增殖，并促进其凋亡。 [关键词】 白细胞介素24；腺病毒 ；树突状细胞；细胞凋亡 [中图分类号] R373．39 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2014．O1．007 Dendriticcellstransfected with recombinantadenoviruscarrying ／L-24 geneinducesCTLstopromoteapoptosisofcervicalcancercelllineCaSki PAN Wei-wei，CAO Li—xian ，XU Ying ，SHEN Zhong-fei，YIFa-ping ，SONG Fang— zh0u (DepartmentofBiology，JiaxingUniversityCollegeofMedicine，Jiaxing314001，China；DepartmentofBiochemistryand MolecularBoilogy，ChongqingUniversityofMedicalSciences，Chongqing400016，China．E-mail：aidspan@163．com) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatethetherapeuticpotentialofinterleukin-24(IL-24)incancertreatment，we observedtheinductiveeffectofcytotoxieT—lymphocytcs(CTLs)againsthumancervicalcnacercelllineCaSkiusingden· driticcells(DCs)transfectedwithrecombinnatadenoviruscarryingIL-24gene(Ad—IL-24-DCs)．METHODS：Immature mouseDCswereisol