Bmi-1基因过表达对人正常胃黏膜上皮细胞株GES-1增殖的影响.pdfVIP

理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28(5)：807—810 · 807 ·． [文章编号] 1000—4718(2012)05-0807—04 Bmi一1基因过表达对 人正常 胃黏膜上皮细胞株 GES一1增殖的影响 练国达 ， 邓 辉 ， 陈茵婷， 曾林涓， 张秋波， 钱辰琛 ， 黄开红 (中山大学孙逸仙纪念医院消化内科 ，广东 广州 510120) [摘 要] 目的：探讨原癌基因B淋巴瘤莫洛尼鼠白血病病毒插入区1(Bmi—J)过表达对人正常胃黏膜上 皮细胞株GES一1增殖的影响。方法：采用逆转录病毒介导转染方法将携带原癌基因Bmi—J的质粒或空质粒稳 定转染 GES一1细胞，通过real—timePCR及 Westernblotting在 mRNA及蛋白水平鉴定转染效果。流式细胞术检 测过表达Bmi—J对GES一1细胞周期的影响。应用CCK一8(CellCountingKit一8)试剂盒检测稳定转染Bmi—J对 GES一1细胞增殖的影响。结果：Real—timePCR及Westernblotting结果均表明成功建立稳定转染Bmi—J基因的 GES一1细胞株。流式细胞术结果表明，过表达Bmi—J基因使GES一1细胞Go／G。期减少，G：／M期和 s期细胞增 多。生长曲线显示 ，过表达Bmi—J基因使 GES一1细胞增殖速度 明显提高。结论：过表达Bmi—J基因能调控 GES一1细胞的细胞周期，促进GES一1细胞的增殖。 [关键词] GES一1细胞；胃肿瘤；B淋巴瘤莫洛尼鼠白血病病毒插入区1；细胞周期 [中图分类号] R735．2 [文献标志码] A d0i：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．05．007 EffectofBmi-·-1geneoverexpression on proliferation of human gastric mucosalepithelialcelllineGES--1 LIANGuo—da，DENGHui，CHENYin—ting，ZENGLin—juan，ZHANGQiu—bo， QIANChen—chen，HUANGKai—hong (DepartmentofGastroenterology，SunYat—senMemorialHospital，SunYat—senUniversity，Guangzhou510120，China． E—mail：kaihonghuang@yahoo．corn) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheeffectofBlymphomaMoloneymurineleukemiavirusinsertionregion1 (Bmi—J)geneoverexpressionontheproliferationofahumannormalgastricepithelialcelllineGES一1．METHODS： TheplasmidcontainingBmi—JgeneoremptyplasmidwastransfectedintoGES一1cellsbyretroviralmediation．Theex· pressionofBmi一1atmRNAandproteinlevelsWasdetectedbyqunatitativereal—timePCR (qRT—PCR)analysisnad Western blotting．respectively．TheeffectofBmi—JgeneoverexpressiononthecellcycleofGES一1cellsWas evaluated byflow eytometry．Th eproliferationofthestablytransfeetedceilswasmeasuredbyCellCountingKit一8．RESULTS：The resultsofqRT——PCR naalysisna dWestern blottingdemonstrated thatstab