bFGF对人脐带间充质干细胞增殖及胶原产生的影响.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2013，29(3)：509．514 · 509 · [文章编号] 1000-4718(2013)03—0509—06 bFGF对人脐带间充质干细胞增殖及胶原产生的影响 林 丽 ， 林绍强 ， 王晓玉 ， 张 羡 (暨南大学附属第一医院妇产科 ，广东 广州 510632；。温州医学院药学院生物制药系，浙江 温州 325035) [摘 要】 目的i观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)增殖及 I、III型 胶原产生的影响。方法：贴壁培养 hUCMSCs，流式细胞术分析其表面标记 (CD45、CD34、CD105、CD29和 HLA- DR)，成脂及成骨诱导其分化，以鉴定其为间充质干细胞，确定bFGF促增殖最适浓度为20 g／L。分为实验组和对 照组，实验组添加 bFGF (20 g／L)于 DMED／F12培养液中，对照组使用 DMED／F12常规培养液。MTF法测定 hUCMSCs存活和增殖能力，分析bFGF对hUCMSCs增殖的影响，RT—PCR测定其I、III型胶原 mRNA的变化 ；West— eYnblotting测定其 I、III型胶原蛋 白的含量。结果：MTr生长 曲线提示 bFGF促进 hUCMSCs的增殖。用含与不含 bFGF培养基培养的hUCMSCs均表达 CD29，不表达 CD34、CD45和 HLA—DR，油红 O染色和茜素红染色阳性。RT— PCR结果显示了实验组 I、III型胶原mRNA表达较对照组减少(P0．05)。Westernblotting检测结果显示了实验 组 I、III型胶原蛋白的表达较对照组减少 (P0．05)。结论：bFGF可显著促进 hUCMSCs增殖 ，且不改变细胞的表 面标志物表达。bFGF对hUCMSCsI、Ⅲ型胶原mRNA和蛋白的表达呈抑制效应，提示其在促进创面愈合的同时可 能不会引起 I、Ⅲ型胶原蛋白沉积，从而减少瘢痕增生。 [关键词] 碱性成纤维细胞生长因子；人脐带间充质干细胞；I型胶原；III型胶原 [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2013．03．022 Effectsofbasicfibroblastgrowthfactoronproliferationandcollagenpro- ductioninhumanumbilicalcordmesenchymalstem cells LIN Li，LIN Shao-qiang ，WANG Xiao—yu ，ZHANG Xian (DepartmentofObstetricsandComecology，theFirstAffiliatedHospital， 凇nUniversity，Guangzhou510632，China； DepartmentofBiologicalPharalaceutcis，SchoolofPharmacy，WenzhouMedicalCollege，Wenzhou325035，China．E— mail：twxy@ u．edu．crt) [ABSTRACT] AIM：Toobservethegrowthpatternandsurfacemarkersofhumanumbilicalcordmesenchymal stemcells(hUCMSCs)andtoexploretheinfluenceofbasicfibroblastrgowthfactor(bFGF)ontheproliferationandcolla— genproductioninhUCMSCsculturedinvitro．METHODS：hUCMSCswereisolatedbyenzymedigestionmethodandad— herentculture．ThesurfacemarkersCIM5，CD34，CD105，CD29andHLA-DR ofthecellswereanalyzedb