siRNA沉默MAG促进脑出血后大鼠运动功能的改善.pdfVIP

· 274 · 理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2014，30(2)：274：77 [文章编号] 1000—4718(2014)02—0274—04 siRNA沉默MAG促进脑 出血后 大鼠运动功能的改盖仁术 刘安民 ， 罗 铭 ， 蔡望青。， 陈 舒 ， 何明亮 ， 潘伟生 (中山大学孙逸仙纪念医院 神经外科 ，肿瘤科 ，广东 广州510120；香港中文大学 ，中国香港) [摘 要] 目的：研究慢病毒介导的siRNA沉默髓鞘相关糖蛋 白(MAG)对脑出血后脱髓鞘再生和神经功能 恢复的影响。方法：sD大鼠45只，随机分为3组：模型+siRNA组、模型+PBS组和正常对照组，每组 15只。胶原 酶诱导建立脑出血模型，据不同组别于模型术后 1d立体定向下进行侧脑室注射携带MAG基因siRNA的慢病毒和 PBS。分别于治疗前 1d和治疗后 1、7、14、21d用Rotarod运功功能评分检测大鼠神经功能情况，应用劳克坚牢蓝 (1uxolfastblue)检测脑损伤区的神经纤维恢复情况，利用免疫组化和Westernblotting检测MAG的表达变化。结 果：Rotarod评分检测脑出血模型大鼠术后的运动功能，模型+siRNA组的神经功能改善和神经纤维修复较模型+ PBS组明显提高(P0．05)，劳克坚牢蓝染色示siRNA组较 PBS组的神经纤维损害范围缩小，siRNA组的MAG蛋 白的表达较PBS组明显下降(P0．05)。结论 ：siRNA沉默MAG后明显提高神经纤维髓鞘再生能力 ，促进脑出血 后神经功能缺失的修复。 [关键词] 髓鞘相关糖蛋白；RNA干扰；髓鞘再生；脑出血；大鼠 [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2014．02．014 TherapeuticeffectofMAG genesilencingbysiRNA onremyelinationand motorrecoveryafterintracerebralhemorrhageinrats LIU An—min ，LUO Ming ，CAIWang—qing ，CHEN Shu ，HE Ming—liang ，PAN Wei— sheng (DepartmentofNeurosurgery，DepartmentofOneology，SunYat—senMemorialHospital，SunYat—senUniversity，Guang— zhou510120，China；ChineseUniversityofHongkong，Hongkong，China．E-mail：drliuam@aliyun．com) [ABSTRACT] AIM：Tostudythefunctionalrehabilitativeeffectsoflentiviralvector—mediatedsiRNAsilencing myelin—associatedglycoprotein (MAG)onneurologicalimprovementandremyelinationafterintracerebralhemorrhage (ICH)inrats．METHODS：ICHwasinducedin45adultmaleSprague—Dawleyratsbyastereotacticallyguidedinjection ofbacterialtypeIVcollagenaseintotherightinternalcapsule．Lentiviralvector-mediatedsiRNAtargetingMAG(siRNA)， orPBSwasadministeredleftintracerebroventricularly1dafterrightinternal capsuleICH．TheRotarodmotortestscores weredetermined1dbeforeand1d，7d，14dand21daftert