恶性肿瘤细胞对小鼠2-细胞胚胎体外发育的影响.pdfVIP

维普资讯 · 384 · 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 200．7．，23(2)：384-386 [文章编号] 1003—47l8(2007l02—0384-03 · 短篇论著 · 恶性肿瘤细胞对小鼠2．一细胞胚胎体外发育的影响 马 芳 ， 王智彪 ， 周 兰 ， 赵 颉 (重庆医科大学生物医学工程系，重庆400016； 四川大学华西基础医学与法医学院，成都 610041) [摘 要] 目的：探讨生命早期形式与恶性肿瘤细胞在相同微环境下的早期胚胎发育情况和肿瘤细胞的生 物学行为。方法：建立小鼠2一细胞胚胎 一恶性肿瘤细胞(HepG2，SKOV3，HNE1，Hepal一6，B16，CHO)体外共培养 模型，观察小鼠胚胎的发育状况和恶性肿瘤细胞的生物学行为。结果：处于不同种属源性和胚层来源恶性肿瘤微 环境的小鼠胚胎4一细胞形成率，桑葚胚形成率和囊胚形成率及其形成的囊胚细胞数 目与对照组比较无显著差异 (P0．05)。小鼠的2一细胞胚胎能在人源性和鼠源性不同胚层来源的恶性肿瘤细胞体外培养环境中按一定的时 间顺序发生卵裂、卵裂球紧密化、分化 、囊胚腔形成，而肿瘤细胞的形态、增殖及核分裂相与对照组比较没有明显差 异。结论：在共培养环境中，恶性肿瘤细胞对小鼠2一细胞胚胎的发育时程没有阻滞和破坏作用，且与恶性肿瘤细 胞的种属和胚层来源无关。小鼠早期胚胎能在不同种属和胚层的恶性肿瘤环境中按正常体外培养发育时程发育， 这可能与早期胚胎发育的自我组织、高适应性和肿瘤细胞分泌的某些因子有关。 [关键词] 胚胎；胚泡；肿瘤；发育生物学 [KEYWORDS] Embryo；Blastocyst；Neoplasms；Developmentalbiology [中图分类号] R73；Q1 [文献标识码] A 自Lobstein和 Reeamier提出肿瘤 的胚胎性起源概念 以 一 6(内胚层来源)，卵巢癌细胞系 一CHO(中胚层来源)，黑 来，早期胚胎细胞与恶性肿瘤细胞生物学的相似性及比较性 色素瘤细胞系一B16(外胚层来源)均购 自上海细胞研究所 ， 研究 日益受到了人们的关注。Brinster等将2—4个 CBAT6T6 由本实验室传代、保种。细胞培养瓶及 24孔板 (FALCON 骨髓瘤细胞和 129／SVS畸胎瘤细胞注入另一 Swiss小鼠来源 BD)。RPMI一1640／DMEM、FBS(Gibco—BRL)DNEM／F一12 的囊胚腔，实验结果产生了正常表型的嵌合子代。如何深入 培养基、胰酶、EDTA／HEPES及 L一谷氨酰胺 (Sigma)。SIX— 理解直至揭示胚胎发育和肿瘤发生、发展两种现象的内涵， ILLD200解剖显微镜 ，LG一1521冷光源，I](70型倒置显微镜 ， 是一个十分棘手的问题。尽管早期胚胎和肿瘤细胞的共培 BX40型生物显微镜以及视频时差显微摄像系统(Olympus)， 养在体外受精一胚泡移植和胚胎干细胞工程 中有报道，但是 吸胚针 (实验室 自制)，医用4号不锈钢针头 TC2323型 CO， 仅限于利用经放射线和丝裂霉素处理后的肿瘤细胞为早期 孵箱 (Shd—Lab)。 胚胎提供某些胚胎所需要的生长因子。我们实验室已经建 2 方法 立了小鼠囊胚一恶性肿瘤体外共培养模型，观察到小鼠囊胚 2．1 细胞培养 NIH31’3、HePG2、SKOV3、HNE1、CHO及 能 “植入”恶性肿瘤细胞…。本研究建立未经处理的不同胚 B16细胞系用含 10％FBS／10U／L的青霉素、100ms／L链霉 层和种属来源的肿瘤细胞与小鼠2一细胞期胚胎的共培养系 素 、10mmol／LHEPES及2mmoL／LL一谷氨酰胺的 RPMI一 统，从细胞整体调控水平上来认识两种生命形式的整体生物 1640完全培养液培养，常规传代。Hepal一6用 10％FBS／ 学变化 ，为理解早期胚胎的发育和肿瘤细胞的生物学行为及 10U／L的青霉素、100ms／L链霉素、10mmo~LHEPES及 其两种生命现象的交叉研究、解读生命现象和病理现象提供 2mmoVLL一