二氮嗪对冷保存诱导的大鼠供心Smac／DIABLO蛋白表达的抑制作用.pdfVIP

· 1676· 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2009箜(2)； 76二 墨 [文章编号] 1000-4718(2009)09—1676—05 二氮嗪对冷保存诱导的大鼠供心 Smac／DIABLO 蛋 白表达的抑制作用木 郑鸣之 ．一， 蒋建平 ， 陈文良 ， 张小兵 ， 朱 立 ， 沈岳 良 ， 陈莹莹。 (浙江医学高等专科学校药理学教研室，浙江 杭州310053；浙江大学 基础医学国家理科人才培养基地， 医学院生理学教研室 ，浙江 杭州 310058) [摘 要】 目的：探讨线粒体ATP敏感性钾离子通道 (mitoK )开放剂二氮嗪(DE)对离体大鼠供心不同时 程冷保存时促凋亡蛋白Smac／DIABLO表达的影响及机制。方法：sD大鼠随机分为3组，包括空白对照组、单纯冷 保存组、DE组(Celsior保存液中含30txmolfLDE)，后2组又按冷保存时程不同，分别分为3、6、9、12h组。实验结 束后采用原位末端标记染色法 (TUNEL)检测心肌细胞凋亡，采用Westernblotting法检测心肌组织中easpase一3蛋 白及胞浆Smac／DIABLO蛋白表达。结果：(1)在Celsior保存液中加入DE后，心肌细胞凋亡指数及 easpase一3蛋 白表达显著低于相应单纯冷保存组。(2)DE可使Smac／DIABLO蛋白表达高峰由冷保存6h延迟至9h。(3)DE 的上述作用可被mitoK 通道特异性阻断剂5一羟基葵酸盐(5一HD)所取消。结论：DE具有对抗冷保存诱导心肌 细胞凋亡的作用，这种保护作用可能与其激活mitoK 通道和减少促凋亡蛋白Smac／DIABLO表达有关。 [关键词】 心脏保存；线粒体ATP敏感性钾通道；二氮嗪；蛋白质Smac／DIABLO [中图分类号] R363 [文献标识码] A Inhibitionofhypothermicpreservation——inducedSmac／DIABLO protein expressionbydiazoxidein donorratmyocardium ZHENGMing—zhi ，JIANG Jian—ping ，CHEN Wen—liang ，ZHANGXiao—bing， ZHU Li，SHEN Yue—liang ，CHEN Ying—ying (DepartmentofPharmacology，ZhejiangMedicalCollege，Hangzhou310053，China；NationalEducationBaseforBasic MedicalSciences，Departmentof iology，SchoolofMedicine，ZhejiangUniversity，Hangzhou310058，China．E— mail：bchenyy@咖．edu．Cn) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheeffectofamitochondrialATP～sensitivepotassiumchannel(mitoK^re)O— penerdiazoxide(DE)onSmac／DIABLOproteinexpressionsinratheartsufferedfromdifferentdurationofhypothermic preservation．M ETHODS：TheLangendorffmodelofisolatedratheartWas used．Afterstoredin4oC Celsiorsolutionwith orwithoutDE(30I~mol／L)fordifferenttime(0，3，6，9or12h)．CellapoptosisWaSdetectedbyTUNELtechnique． TheexpressionofSmac／DIABLOproteinincytoplasm andtotalcaspase一3proteininmyocardiatissueWas alsona