臭灵丹中黄酮类化合物对人喉癌细胞Hep一2凋亡的影响及机制.pdfVIP

· 1362· 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2010，26(7)：1362—1365 [文章编号] 1000—4718(2010)07—1362—04 臭灵丹 中黄酮类化合物对人喉癌细胞 Hep一2 凋亡的影响及机制 曹长妹 ， 沈伟哉 ， 李药兰 ， 王 辉 (暨南大学 医学院解剖学系，药学院中药及天然产物研究所 ，。中药药效物质 基础及创新药物研究广东省重点实验室 ，医学院微生物及免疫学系，广东 广州510632) [摘 要] 目的：探讨中药臭灵丹中黄酮类化合物诱导人喉癌细胞 Hep一2凋亡的机制。方法：MTY法检测 分离 自臭灵丹的黄酮类化合物3，5一二羟基 一6，7，3’，4’一四甲氧基黄酮 (HTMF)对2种正常细胞的毒性和对 3 种肿瘤细胞株的增殖抑制作用 ；采用流式细胞仪检测化合物对 Hep一2细胞凋亡率的影响；Westernblotting法检测 凋亡蛋 白caspase一3和caspase一9的变化。结果：HTMF显著抑制Hep一2细胞的增殖并呈浓度、时间双重依赖性 关系，但对正常细胞Vero和EVC304的毒性较小，对 A549和 HepG2细胞抑制作用小。流式细胞仪检测结果显示 HTMF对 Hep一2细胞有促凋亡作用并呈明显的量效、时效关系。Westernblotting结果显示HTMF可诱导 Hep一2 细胞中caspase一3和caspase一9蛋白的活化，并呈时间依赖性关系。结论：HTMF对人喉癌细胞 Hep一2的生长有 显著的抑制作用，其机制可能通过激活caspase一9进而活化easpase一3诱导 Hep一2细胞凋亡。 [关键词] 黄酮类化合物 ；Hep一2细胞 ；细胞凋亡；半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3；半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9 [中图分类号】 R285．5 [文献标识码】 A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2010．07．023 Effectof3，5一hydroxy一6，7，3’，4’一tetramethoxyflavoneisolatedfrom Laggerapterodonta on apoptosis0fH印 -2cellsin vitro CA0 Chang—shu ，SHEN Wei—zhai．LIYao—lan 。WANG Hui (。DepartmentofAnatomy，SchoolofMedicine，InstituteofTraditionalChineseMedciineNaturalProducts，Collegeof Phamta~y，GuangdongProvinceKeyLaboratoryofPharma~odynamciConstituentsofTCM andNewDrugsResearch， DepaamentofMcirobiologyandImmunoolgy，SchoolofMedicine，．~nanUnive~ity，Guangzhou510632，China．E—mail： tshenwz@ M．edu．crt) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectof3，5一hydmxy一6，7，3’，4’一tetramethoxyflavone(HTMF)iso— latedfrom LaggerapterodontaonHep一2cellapoptosisandtheunderlyingmechanism．METHODS：TheMTrassaywas usedtoobservetheeytotoxicityofHTMFtothenormalcellsandtheinhibitoryeffectofHTMFontheproliferationoftumor cells．Th eapoptosiswasdeterminedbyflow cytometry．Westernblottingwasusedtodetecttheexpressionofcaspase一3 andcas