UV-+spectrophotometric+screening+of+5α-+reductase+inhibitors+for+benign+prostatic+hyperplasia+treatment.pdfVIP

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2015-08-04 发布于江西
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UV-+spectrophotometric+screening+of+5α-+reductase+inhibitors+for+benign+prostatic+hyperplasia+treatment.pdf

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中国病理生理

维普资讯 · 828· 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2007，23(4)：828—832 [ArticleID] 1000—4718(2007)04—0828—05 UV —spectrophotometricscreeningof5ct—reductaseinhibitorsfor benign prostatichyperplasiatreatment XUDong—hui，WANG Zhao—he，WANG Li～hong，MEIXue—ting，XU Shi—bo (LaboratoryofTraditionalChineseMedicine andMarineDrugs，SchoolofPharmaceutical Sciences，SunYet—senUniversity，Guangzhou510275，China．E—mail：Lsdb@zsu．edu．ClZ) [ABSTRACT] AIM：Tranditionalmethodsofscreeningdrugsforbenignprostatichyperplasia(BPH)requiresse— nilemaleanimalssuchasdogsorrats．Itconsumesalongtimetogettheresults．Over—expressionoftypeII5ct—reduc— taseinprastateinducesBPH．Afastandefficientscreeningmodeloftype 1I5a——reductaseinhibitorsforBPHwassetup inthispaper．M ETHODS：Microsomeswereextractedfrom maleSprague—Dawleyratliversbygradientcentrifugation． TypeII5ct——reductaseenzyme——catalyzedreactionwasassayedbyUV——spectrophotometryusingtestosteroneasasubstrate andNADPH ashydrogendonor．ThechangeofenzymaticactivitywasrecordedwithaNADPH wavelengthof340nm by subtracteddescendingvelocityofthecontrol(without5ct—reductase)．Effectsatdifferentconditions(temperatures，pH， enzymeandtestosteroneconcentrations)Oll5a—reductasewereassayed．RESULTS：Thesuitableconditionoftype ／15ct — reductasereactionwasdefinedasconcentrationof109．05mgprotein／Lenzyme(pH6．00)with2Ixmol／Ltestosterone at37oC．Michaelis’constantoftypeII5ct—reductasewas0．6Ixmol／L．Finasteride，anewdurgofrBPH，significnatlyin— hibitedactivityoftype115ct～reductase．IC50offinasterideWas64．1nmol／L．Assolventofdurgs，concentrationofetha— nolbelow1．1％ didnotinhibiteenzymaticactivity(P0．05)．Concentrationofethanolabove1．6％ couldobviously suppressenzy